Question

【題目】如圖所示為血紅蛋白提取和分離的部分裝置，回答下列問題。

（1）在進行樣品處理時首先要對紅細胞進行洗滌，目的是_______________。紅細胞破碎后，通過_________________法將血紅蛋白從混合液中分離出來，圖甲所示為分離結(jié)果。若紅細胞洗滌次數(shù)過少，則圖甲結(jié)果可能會_____________。

（2）圖乙裝置可用于_________過程�，F(xiàn)有一定量的血紅蛋白溶液，進行上述操作時若要盡快達到理想的實驗效果，可以_____________________（寫出一種方法）。

（3）通過凝膠色譜法將樣品進一步純化，最后經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定。凝膠色譜法是根據(jù)_________________分離蛋白質(zhì)的方法。加人SDS可以使蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率完全取決于_________________。

Answer 1

【答案】去除雜蛋白（血漿蛋白），以利于后續(xù)步驟的分離純化 低速短時間離心 分層不明顯 透析（粗分離） 增加緩沖液的量（或及時更換緩沖液） 相對分子質(zhì)量大小 分子的大小

【解析】

血紅蛋白的提取和分離流程為：紅細胞的洗滌→血紅蛋白的釋放→分離血紅蛋白溶液→透析→凝膠色譜柱的制作→凝膠色譜柱的裝填→樣品的加入和洗脫。

（1）洗滌紅細胞的目的是去除雜蛋白（血漿蛋白），以利于后續(xù)步驟的分離純化。紅細胞破碎后可以采用低速短時間離心的方法將血紅蛋白從混合液中分離出來。若紅細胞洗滌次數(shù)過少，血漿蛋白可能未被除凈，導(dǎo)致離心分層時各種成分分層不明顯。

（2）圖乙裝置可用于透析過程，若要盡快達到理想的實驗效果，則可采用增加緩沖液的量或及時更換緩沖液的方法。

（3）①凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的方法。②加入SDS可以使蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率完全取決于分子的大小。