Question

6．制備單克隆抗體的過程中，需篩選出雜交瘤細(xì)胞．一般情況下，細(xì)胞內(nèi)DNA合成除了主要途徑以外還有一條輔助途徑，而骨髓瘤細(xì)胞沒有此輔助途徑，DNA合成的主要途徑可以被氨基碟呤阻斷，利用這一特性可以篩選出雜交瘤細(xì)胞．
（1）制備單克隆抗體時，選用B淋巴細(xì)胞的原因是B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生抗體，選用骨髓瘤細(xì)胞的原因是骨髓瘤細(xì)胞可以無限增殖．研究發(fā)現(xiàn)，被激活的B淋巴細(xì)胞內(nèi)含有發(fā)達(dá)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，這與產(chǎn)生大量的抗體的功能相適應(yīng)．
（2）加入適量氨基碟呤的培養(yǎng)基稱為選擇 培養(yǎng)基，氨基喋呤的作用主要是為了淘汰骨髓瘤細(xì)胞及自身融合的骨髓瘤細(xì)胞．
（3）誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合常用的化學(xué)試劑是PEG．對雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)需要適CO₂，CO₂的作用是維持培養(yǎng)液的PH值．

Answer 1

分析 1．制備單克隆抗體的誘導(dǎo)過程有：正常小鼠免疫處理、動物細(xì)胞的融合（物、化、生法）、雜交瘤細(xì)胞的篩選與培養(yǎng)、專一抗體檢驗陽性細(xì)胞培養(yǎng)、單克隆抗體的提純．
2．單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞．利用動物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞（A為B淋巴細(xì)胞，B為骨髓瘤細(xì)胞），不需要A、B、AA、BB型細(xì)胞．第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞．
3．雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．

解答 解：（1）具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生抗體，因此制備單克隆抗體時選用B淋巴細(xì)胞．由于骨髓瘤細(xì)胞可以無限增殖，因此選用骨髓瘤細(xì)胞．效應(yīng)B細(xì)胞能合成并分泌抗體，并需要粗面型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)加工和高爾基體的進(jìn)一步加工和運(yùn)輸，所以細(xì)胞內(nèi)含發(fā)達(dá)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體．
（2）加入適量氨基碟呤的培養(yǎng)基為選擇性培養(yǎng)基．根據(jù)題干“細(xì)胞內(nèi)DNA合成除了主要途徑以外還有一條輔助途徑，而骨髓瘤細(xì)胞沒有此輔助途徑，DNA合成的主要途徑可以被氨基碟呤阻斷”，可以獲知：骨髓瘤細(xì)胞及自身融合的骨髓瘤細(xì)胞在含有氨基喋呤的培養(yǎng)基上不能存活，但雜交瘤細(xì)胞可以存活，因此氨基喋呤的作用主要是為了淘汰骨髓瘤細(xì)胞及自身融合的骨髓瘤細(xì)胞．
（3）誘導(dǎo)細(xì)胞融合常用的化學(xué)試劑是PEG．對雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)需要適CO₂，CO₂的作用是維持培養(yǎng)液的PH值．
故答案為：
（1）B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生抗體    骨髓瘤細(xì)胞可以無限增殖     產(chǎn)生大量的抗體
（2）選擇       骨髓瘤細(xì)胞及自身融合的骨髓瘤細(xì)胞
（3）PEG     維持培養(yǎng)液的PH值

點(diǎn)評 本題考查了單克隆抗體的制備的相關(guān)知識，要求考生能夠識記單克隆抗體制備的流程、原理、篩選目的以及雜交瘤細(xì)胞、單克隆抗體的特點(diǎn)和應(yīng)用等知識，難度適中．