Question

圖為某種質(zhì)粒表答載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位點(diǎn)，amp^R為青霉素抗性基因，tct^R 為四環(huán)素抗性基因，P為啟動(dòng)子，T為終止子，ori為復(fù)制原點(diǎn)。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點(diǎn)。據(jù)圖回答：

 

(1)將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒該表達(dá)載體分別用EcoRI酶切，酶切產(chǎn)物用ＤＮＡ連接酶進(jìn)行連接后，其中由兩個(gè)DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有       、         、          三種 。若要從這些連接產(chǎn)物中分離出         ，需要對(duì)這些連接產(chǎn)物進(jìn)行分離純化。

(2)用上述3種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。之后將這些宿主細(xì)胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是         ；若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是           。

(3)目的基因表達(dá)時(shí)，RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)是       ，其合成的產(chǎn)物是        。

 (4)在上述實(shí)驗(yàn)中，為了防止目的基因和質(zhì)粒表達(dá)載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，酶切時(shí)應(yīng)選用的酶是                。

來

 

Answer 1

【答案】

（1）目的基因－載體連接物　　  載體－載體連接物　   目的基因－目的基因連接物　　　重組質(zhì)粒（目的基因－載體連接物）

（2）載體－載體連接物 　　  目的基因－載體連接物、載體－載體連接物

（3）啟動(dòng)子（P）　　mRNA

（4）EcoRI和BamHI

【解析】略