Question

【題目】CTLA-4是人體中一種能夠抑制T細(xì)胞增殖的蛋白質(zhì)�？茖W(xué)家通過單克隆抗體制備技術(shù)來生產(chǎn)CTLA-4抗體，用于增強(qiáng)T細(xì)胞對腫瘤的免疫反應(yīng)，方法如下：

（1）將___________注入小鼠體內(nèi)，從免疫小鼠體內(nèi)分離獲得淋巴細(xì)胞，與___________進(jìn)行融合，再用___________進(jìn)行篩選獲得雜交瘤細(xì)胞。該細(xì)胞的特點(diǎn)是___________。對上述細(xì)胞還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和___________，經(jīng)過一系列篩選獲得可大規(guī)模培養(yǎng)的細(xì)胞群體。

（2）臨床試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，利用小鼠制備的單克隆抗體（鼠源單克隆抗體）具有外源性，容易被人體免疫系統(tǒng)清除。抗體結(jié)構(gòu)如圖所示，抗體與抗原特異性結(jié)合的區(qū)域是V區(qū)，引起人體免疫反應(yīng)的主要是C區(qū)�？茖W(xué)家通過設(shè)計“人鼠嵌合抗體”來解決這一問題。從人體中獲取編碼抗體___________（填“C區(qū)”或“V區(qū)”）序列的基因，然后從雜交瘤細(xì)胞中提取編碼鼠源單克隆抗體___________（填“C區(qū)”或“V區(qū)”）序列的基因，對兩種基因進(jìn)行修飾、拼接，利用運(yùn)載體將重組基因?qū)�入骨髓瘤�?xì)胞，并進(jìn)行培養(yǎng)，獲取人鼠嵌合抗體。設(shè)計并制備人鼠嵌合抗體屬于___________（生物工程）。

（3）與鼠源單克隆抗體相比，人鼠嵌合抗體的優(yōu)點(diǎn)是___________。

Answer 1

【答案】CTLA-4（或“CTLA-4蛋白”） 骨髓瘤細(xì)胞 特定的選擇培養(yǎng)基 既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一的抗體 專一抗體檢測 C區(qū) V區(qū) 蛋白質(zhì)工程 既保留單克隆抗體的高特異性又降低人體對鼠源單克隆抗體的免疫排斥，從而提高治療效果

【解析】

1、單克隆抗體

(1)制備過程

(2)優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高，可大量制備。

(3)用途：作為診斷試劑；用于治療疾病和運(yùn)載藥物。

2、蛋白質(zhì)工程

(1)流程圖：

A．轉(zhuǎn)錄，B.翻譯，C.分子設(shè)計，D.多肽鏈，E.預(yù)期功能。

(2)結(jié)果：改造了現(xiàn)有蛋白質(zhì)或制造出新的蛋白質(zhì)。

(3)應(yīng)用：主要集中應(yīng)用于對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，改良生物性狀。

（1）由單克隆抗體的制備流程可知，將CTLA-4注入小鼠體內(nèi)，從免疫小鼠體內(nèi)分離獲得淋巴細(xì)胞，與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，再用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選獲得既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一的抗體的雜交瘤細(xì)胞，對上述細(xì)胞還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測，經(jīng)過一系列篩選獲得可大規(guī)模培養(yǎng)的細(xì)胞群體。

（2）抗體結(jié)構(gòu)如圖所示，抗體與抗原特異性結(jié)合的區(qū)域是V區(qū)，引起人體免疫反應(yīng)的主要是C區(qū)。據(jù)蛋白質(zhì)工程流程，科學(xué)家從人體中獲取編碼抗體C區(qū)序列的基因，然后從雜交瘤細(xì)胞中提取編碼鼠源單克隆抗V區(qū)序列的基因，對兩種基因進(jìn)行修飾、拼接，利用運(yùn)載體將重組基因?qū)�入骨髓瘤�?xì)胞，并進(jìn)行培養(yǎng)，獲取人鼠嵌合抗體。

（3）鼠源單克隆抗體具有外源性，容易被人體免疫系統(tǒng)清除。通過C區(qū)改造的人鼠嵌合抗體既保留單克隆抗體的高特異性又降低人體對鼠源單克隆抗體的免疫排斥，從而提高治療效果。