Question

【題目】回答（一）、（二）小題

（一） 苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中，對環(huán)境有嚴重危害。小明同學準備依據(jù)下圖操作步驟，從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請回答下列問題:

（1）酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、K2HPO4 、MgSO4、苯酚和水，其中可作為碳源的有____________。

（2）將采集到的樣品接種培養(yǎng)，苯酚用量應隨轉接次數(shù)增加而逐漸___________。以達到富集酚降解菌的目的。若上圖平板中菌落過于密集，應進一步_________，以便于菌落計數(shù)與分離。制備平板培養(yǎng)基時除了需要水、營養(yǎng)物質外，還必須添加______________。

（3）下圖為連續(xù)劃線法示意圖，在圖中_____________（填圖中序號）區(qū)域更易獲得單菌落。

（4）采用比色測定法（使用苯酚顯色劑）檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進行顯色反應，下表中 1 ~5 號比色管的苯酚濃度應分別為____________。

如果廢水為 50 mg/ L 苯酚溶液， 降解后約有 21%的苯酚殘留， 則需將殘留液稀釋____________________________ （填序號：①5②10③20）倍后，再進行比色。

（二）回答與動物克隆有關的問題

2017 年 11 月，世界上首個體細胞克隆猴“中中”在中國誕生。這一研究成果入選“2018 年度中國科學十大進展”。

（1）克隆猴的出生屬于____________生殖。在培養(yǎng)過程中，需要將體細胞核與去核卵細胞融合， 形成____________，待發(fā)育到____________，轉移到_______________的母猴中。

（2）克隆猴的成功誕生，證明了在胚胎和個體發(fā)育中，___________具有調控細胞核發(fā)育的作用。但從 1997 年第一只克隆羊“多莉”誕生，到第一只克隆猴“中中”的誕生，歷經20 年。動物克隆始終存在很大的困難，這是由于______________。

（3）克隆猴的誕生，在腦認知功能研究、重大疾病早期診斷與干預、藥物研發(fā)等方面，能夠起到 重要 作用。 在藥 物研發(fā) 方面 ， 與 傳統(tǒng)藥 檢對 象相比 ， 克 隆猴 的優(yōu)勢是__________________________。

Answer 1

【答案】蛋白胨、苯酚 增加 稀釋涂布 凝固劑 ③ 0、0．2、0．4、0．6、0．8 ③ 無性 重組細胞 早期胚胎 同期發(fā)情 細胞質 動物細胞在形態(tài)和功能上高度特化/基因表達調控使得細胞合成了專一的蛋白質 基因、生理結構與人類更為接近，可以更好地觀察藥效

【解析】

1、微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求．對異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是起單一方面的作用。

2、微生物常見的接種的方法

①平板劃線法：將已經熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經培養(yǎng)后可形成單個菌落。

（一）

（1）培養(yǎng)基成分中的有機物均可以提供碳源，即蛋白胨、苯酚均可以作為碳源。

（2）分析實驗可知，實驗目的是篩選苯酚降解菌，因此將采集到的樣品接種培養(yǎng)，苯酚用量應隨轉接次數(shù)增加而逐漸增加，以達到富集酚降解菌的目的。若圖1平板中菌落過于密集，應進一步稀釋涂布，以便于菌落計數(shù)與分離。平板培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基需要加入瓊脂作為凝固劑。

（3）圖2為平板劃線法，隨著劃線次數(shù)的增加，菌種進一步被稀釋，因此圖中③區(qū)域更易獲得單菌落。

（4）進行實驗時，首先需要設置濃度為0的苯酚作為空白對照組，并且6號試管苯酚濃度為1，由此可見，濃度梯度應該為0.2，即表中1～5號比色管的苯酚濃度應分別為0、0.2、0.4、0.6、0.8。如果廢水為50mg/L 苯酚溶液，降解后約有21%的苯酚殘留，即殘留液中苯酚濃度約為10mg/L，與以上6支試管中的濃度相比，需要將殘留液稀釋20倍后，再進行比色。

（二）

（1）克隆猴的出生沒有經過兩性生殖細胞的結合，所以屬于無性生殖。在培養(yǎng)過程中，需要將體細胞核與去核卵細胞融合，形成重組細胞，待發(fā)育到早期胚胎，轉移到同期發(fā)情的母猴中，直至完成胚胎發(fā)育而產出。

（2）克隆猴的成功誕生，證明了在胚胎和個體發(fā)育中，去核的卵母細胞的細胞質具有調控細胞核發(fā)育的作用。動物克隆始終存在很大的困難，這是由于動物細胞在形態(tài)和功能上高度特化或基因表達調控使得細胞合成了專一的蛋白質。

（3）在藥物研發(fā)方面，與傳統(tǒng)藥檢對象相比，克隆猴的優(yōu)勢是基因、生理結構與人類更為接近，可以更好地觀察藥效。