Question

【題目】淀粉酶在工業(yè)生產(chǎn)上應(yīng)用最早，迄今仍是用途最廣、產(chǎn)量最大的酶制劑產(chǎn)品之一。為了提高淀粉酶的生產(chǎn)水平，首先要從土壤中篩選出產(chǎn)淀粉酶的活性菌株。某研究人員對(duì)所取土樣進(jìn)行產(chǎn)淀粉酶的細(xì)菌的分離操作(A組)和計(jì)數(shù)操作(B組)，過程如圖Ⅰ。請(qǐng)回答下列問題：

(1)步驟①取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的信封在使用前都需要___(填操作)，步驟④所用培養(yǎng)基的碳源是___；步驟⑤所用固體培養(yǎng)基的制備步驟是計(jì)算→____→溶化→滅菌→倒平板；步驟⑤⑧接種時(shí)需設(shè)置未接種培養(yǎng)基做對(duì)照，目的是_______。

(2)步驟⑥挑選出的菌落若要頻繁使用，可以采用臨時(shí)保藏的方法，該方法的缺點(diǎn)是________。

(3)步驟⑦中，將1mL菌液分別稀釋10倍和100倍，每種稀釋度經(jīng)過步驟⑧各在3個(gè)平板上接種(每個(gè)平板的接種量為0.1mL)，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，2組平板上的菌落數(shù)分別為59、57、58和2、7、5。據(jù)此可得出每升菌液中的活菌數(shù)為____個(gè)。

(4)圖Ⅱ所用的接種方法____(填“能”或“不能”)對(duì)活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)；甲、乙、丙為劃線的三個(gè)區(qū)域，為正確完成整個(gè)接種過程，接種環(huán)至少進(jìn)行____次灼燒滅菌。

Answer 1

【答案】滅菌 淀粉 稱量 檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染 保存時(shí)間不長(zhǎng)，菌種容易被污染或產(chǎn)生變異 5.8×106 不能 4

【解析】

取樣用的金屬用具可采用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌，防止雜菌污染；固體培養(yǎng)基的制備步驟是計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板；對(duì)活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)常用稀釋涂布法。

(1) 步驟①取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的信封等使用工具在使用前都需要滅菌；步驟④所用培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，用淀粉為唯一碳源；步驟⑤所用固體培養(yǎng)基的制備步驟是計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板；步驟⑤⑧接種時(shí)需設(shè)置未接種培養(yǎng)基做對(duì)照，目的是檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。

(2)步驟⑥挑選出的菌落若要頻繁使用，可以采用臨時(shí)保藏的方法，但該方法存在保存時(shí)間不長(zhǎng)，菌種容易被污染或產(chǎn)生變異的缺點(diǎn)。

（3）步驟⑦的稀釋液為100倍時(shí)形成的菌落平均數(shù)為58，在30~300之間，適于進(jìn)行分離、計(jì)數(shù)。據(jù)此可得出每升菌液中的活菌數(shù)為5.8×106個(gè)。

（4）圖Ⅱ所用的接種方法為平板劃線法，常用稀釋涂布法對(duì)活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)。甲、乙、丙為劃線的三個(gè)區(qū)域，為正確完成整個(gè)接種過程，接種環(huán)至少進(jìn)行4次灼燒滅菌。