Question

【題目】研究人員采用固定化微生物技術(shù)消除河道黑臭底泥和改善水質(zhì)，將乳酸菌、酵母菌群、光合菌群等多種微生物包埋在固體顆粒中制成Ⅰ型和Ⅱ型微生物載體顆粒，如下圖所示。

（1）篩選光合菌群時(shí)，培養(yǎng)基成分中無需添加______，培養(yǎng)乳酸菌、酵母菌群、光合菌群時(shí)需要無氧條件的是______。

（2）在培養(yǎng)酵母菌的培養(yǎng)基中含有蛋白胨、K2HPO4、NaCl、葡萄糖和水，其中可作為碳源的有______。培養(yǎng)微生物前，宜采用______方法對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌。完成下圖甲所示操作，至少需要灼燒接種環(huán)______次。

（3）若研究人員用圖乙所示方法分離培養(yǎng)微生物，該方法稱為______，用______共吸取0.4ml菌液（假設(shè)稀釋倍數(shù)為106）平均等量接種到4個(gè)平板上，放入______培養(yǎng)一段時(shí)間后， 平板上長出的菌落數(shù)分別為156、462、178和191。則每1ml菌液中的酵母菌數(shù)量為______

（4）下圖為試驗(yàn)場(chǎng)內(nèi)水體不同深度處DO（水中溶氧量）隨時(shí)間的變化情況。

在試驗(yàn)場(chǎng)內(nèi)系統(tǒng)運(yùn)行80 天左右，除20 cm以下深度外，其余深度處DO均大于1.5 mg/L，且DO呈上升趨勢(shì)，主要由于微生物載體中包埋的______能使水體DO升高，DO的升高能促進(jìn)微生物載體中包埋的______以及水體中好氧菌的繁殖，致使試驗(yàn)場(chǎng)內(nèi)降解有機(jī)物的速率和能力得到提高。

Answer 1

【答案】碳源 乳酸菌 蛋白胨、葡萄糖 灼燒 6 稀釋涂布平板法 移液管 恒溫培養(yǎng)箱 1.75×109 光合細(xì)菌 酵母菌

【解析】

1、從混合樣品中獲得某種微生物的方法通常有兩種：
第一種是可利用該分離對(duì)象對(duì)某一營養(yǎng)物質(zhì)有一“嗜好”的原理，專門在培養(yǎng)基中加入或不加該營養(yǎng)物質(zhì)，從而使它成為一種選擇培養(yǎng)基（如在含高濃度NaCl的培養(yǎng)基上分離金黃色葡萄糖球菌，在不含N的培養(yǎng)基上分離圓褐固氮菌）；或根據(jù)分離對(duì)象對(duì)pH、溫度和氧氣濃度的喜好，改變培養(yǎng)環(huán)境的理化性質(zhì)，使環(huán)境條件最適宜該微生物的生存，從而達(dá)到分離的目的，將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物。
第二種辦法可利用該分離對(duì)象對(duì)某種抑菌物質(zhì)的抗性，在混合培養(yǎng)物中加入該抑制物，經(jīng)培養(yǎng)后，原來占優(yōu)勢(shì)的微生物生長受抑制，而分離對(duì)象卻可乘機(jī)大大增殖，使之在數(shù)量上占優(yōu)勢(shì)（如在加入青霉素的培養(yǎng)基上分離真核微生物）。

2、統(tǒng)計(jì)平板上菌落數(shù)時(shí)，為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。

（1）篩選光合菌群時(shí)，培養(yǎng)基成分中無需添加碳源，因?yàn)楣夂暇�群可利用二氧化碳和水合成有機(jī)物。酵母菌為兼性厭氧型，乳酸菌為厭氧型，故培養(yǎng)乳酸菌、酵母菌群、光合菌群時(shí)需要無氧條件的是乳酸菌。
（2）酵母菌為異養(yǎng)微生物，培養(yǎng)基中的蛋白胨、K2HPO4、NaCl、葡萄糖和水中，其中可作為碳源的有蛋白胨、葡萄糖。接種前對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌宜采用灼燒滅菌的方法。圖中共劃線五個(gè)區(qū)域，每次劃線前后均要對(duì)接種環(huán)灼燒，故完成圖中所示操作，至少需要灼燒接種環(huán)6次。
（3）根據(jù)圖乙中所示的菌落分布特點(diǎn)可知，該接種方法為稀釋涂布平板法，用移液管共吸取0.4ml菌液（假設(shè)稀釋倍數(shù)為106）平均等量接種到4個(gè)平板上，即每個(gè)平板上接種0.1ml菌液，放入恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長出的菌落數(shù)分別為156、462、178和191，由于計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)選擇菌落數(shù)在30～300之間的，故每1ml菌液中的酵母菌數(shù)量為（156+178+191）÷0.1×106=1.75×109個(gè)。
（4）在試驗(yàn)場(chǎng)內(nèi)系統(tǒng)運(yùn)行80天左右，除20cm以下深度外，其余深度處DO均大于1.5mg/L，且DO呈上升趨勢(shì)，主要是由于微生物載體中包埋的光合細(xì)菌進(jìn)行光合作用產(chǎn)生了氧氣使水體DO升高，而DO的升高又能促進(jìn)微生物載體中包埋的酵母菌以及水體中好氧菌的繁殖，致使試驗(yàn)場(chǎng)內(nèi)降解有機(jī)物的速率和能力得到提高。