Question

【題目】類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)是一種自身免疫病，致殘性強(qiáng)。研究表明，該病的致病機(jī)理與腫瘤壞死因子－α(TNF－α)密切相關(guān)，而一種人鼠嵌合的抗TNF－α單克隆抗體能有效治療RA。如圖為該單克隆抗體制備過(guò)程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

(1)單克隆抗體的制備涉及細(xì)胞工程中的____________、____________技術(shù)。

(2)圖中抗原A是______________，HAT培養(yǎng)基的作用是________________。將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞具有的特點(diǎn)是_______________________________。

(3)醫(yī)療上，把單克隆抗體與化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素相結(jié)合制成“______________”，借助抗體的定向作用將藥物帶到病變細(xì)胞并將其殺死。

(4)單克隆抗體的特點(diǎn)是____________________________________。

Answer 1

【答案】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 動(dòng)物細(xì)胞融合 TNF－α 篩選雜交細(xì)胞 既可以大量增殖又可以產(chǎn)生抗體 生物導(dǎo)彈 特異性強(qiáng)靈敏度高可大量制備

【解析】

本題考查動(dòng)物細(xì)胞工程，考查對(duì)單克隆抗體制備流程、特點(diǎn)及應(yīng)用的理解。明確圖中B淋巴細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞、單克隆抗體的特點(diǎn)是解答本題的關(guān)鍵。

(1)據(jù)圖可知，制備單克隆抗體時(shí)，需要將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，然后對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，該過(guò)程涉及細(xì)胞工程中的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。

(2) 制備人鼠嵌合的抗TNF－α單克隆抗體，首先應(yīng)向小鼠注射抗原TNF－α，使小鼠體內(nèi)產(chǎn)生能分泌抗TNF－α抗體的漿細(xì)胞，HAT培養(yǎng)基作為選擇培養(yǎng)基，B淋巴細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞及二者自身融合的細(xì)胞在該培養(yǎng)基上面不能存活，只有雜交瘤細(xì)胞可以在上面存活，因此可以篩選雜交瘤細(xì)胞。B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜交瘤細(xì)胞既可以大量增殖又可以產(chǎn)生單一抗體。

(3)借助單克隆抗體可以和抗原特異性結(jié)合的特點(diǎn)，把單克隆抗體與化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素相結(jié)合制成“生物導(dǎo)彈”，可以將藥物帶到病變細(xì)胞并將其殺死。

(4)與血清抗體相比，單克隆抗體通過(guò)雜交瘤細(xì)胞克隆化培養(yǎng)獲得，純度高，因此具備特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備的特點(diǎn)。

項(xiàng)目	第一次篩選	第二次篩選
篩選 原因	誘導(dǎo)融合后得到多種雜交細(xì)胞，另外還有未融合的細(xì)胞	由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激，所以需經(jīng)過(guò)選擇性培養(yǎng)
篩選 方法	用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞(“BB”細(xì)胞、“瘤瘤”細(xì)胞)都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞(“B瘤”細(xì)胞)才能生長(zhǎng)	用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開(kāi)始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群
篩選 目的	得到雜交瘤細(xì)胞	得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞