Question

白細(xì)胞介素是一類淋巴因子。研究人員將白細(xì)胞介素的基因?qū)�入到酵母�?xì)胞中，使其分泌出有活性的人白細(xì)胞介素。

（1）目的基因獲取和擴(kuò)增：

①從健康人體外周靜脈血分離得到淋巴細(xì)胞，于37℃培養(yǎng)48h，提取細(xì)胞總RNA，經(jīng)???????????? 作用生成cDNA。

②根據(jù)已知目的基因的核苷酸序列，合成引物、通過PCR擴(kuò)增獲取目的基因，此時(shí)需要加入的反應(yīng)物與生成cDNA時(shí)所加反應(yīng)物不同的是????? （至少寫出兩種）。

（2）重組載體的構(gòu)建：由圖中可知：酶切載體和目的基因用的是___________酶，經(jīng)DNA連接酶處理，形成重組載體。重組載體的化學(xué)本質(zhì)是????????????

（3）將重組載體導(dǎo)入酵母細(xì)胞，在培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時(shí)間后，利用純化的產(chǎn)物進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，可研究人的白細(xì)胞介素對于???????????? 的作用。

 

Answer 1

【答案】

（1）反轉(zhuǎn)錄?? 模板cDNA?? 熱穩(wěn)定DNA聚合酶?? 引物

（2）兩種限制酶EcoRⅠ與EcoR52??? DNA

（3）促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖（抑制腫瘤細(xì)胞增殖）

【解析】

試題分析：（1）以RNA為模板合成DNA需要題干逆轉(zhuǎn)錄（反轉(zhuǎn)錄）。PCR擴(kuò)增獲取目的基因時(shí)需要模板cDNA、熱穩(wěn)定DNA聚合酶、引物、原料。（2）由圖示可知載體和目的基因都有限制酶EcoRⅠ與EcoR52的識別位點(diǎn)和切割位點(diǎn)，所以酶切載體和目的基因用的是兩種限制酶EcoRⅠ與EcoR52，重組載體實(shí)際上是重組DNA,因而其化學(xué)本質(zhì)是DNA。（3）白細(xì)胞介素可治療癌癥，因此可推知白細(xì)胞介素可抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。

考點(diǎn)：本題考查基因工程及基因工程的應(yīng)用，意在考查識圖能力、推理分析能力及識記能力。