Question

【題目】研究表明，HER2/neu是一種原癌基因，它表達的H蛋白在多種惡性腫瘤特別是乳腺癌細胞中過量表達．抗H蛋白單克隆抗體能抑制過量表達H蛋白的乳腺癌細胞的生長，目前已成為有效的生物治療手段．
（1）選擇H蛋白作為單克隆抗體的作用靶點，是因為H蛋白在成年個體的正常組織中（填“低表達”或“高表達”）．H蛋白是一個跨膜蛋白，結構如圖12所示．制備免疫小鼠用的H蛋白（抗原）時，應構建區(qū)基因，轉入原核細胞表達并提純．
（2）將H蛋白注射到小鼠體內，取該小鼠的脾臟細胞與細胞進行融合，使用的化學誘導劑是 ， 細胞融合的原理是 ．
（3）將融合細胞在培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時間后培養(yǎng)基中只有雜交瘤細胞生長．將雜交瘤細胞轉到多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，吸取有克隆生長的細胞培養(yǎng)孔中的（填“上清液”或“沉淀細胞”），應用技術進行抗體陽性檢測．經多次篩選，就能得到產生單克隆抗體的雜交瘤細胞．
（4）將篩選得到的雜交瘤細胞，經過或小鼠腹腔內培養(yǎng)，獲取大量的單克隆抗體．
（5）治療乳腺癌時，可單獨使用抗H蛋白單克隆抗體，也可將該單克隆抗體與抗癌藥物結合構建“生物導彈”，殺死癌細胞．這充分體現了單克隆抗體的特點．

Answer 1

【答案】
（1）低表達；胞外
（2）骨髓瘤；PEG（或“聚乙二醇”）；細胞膜的流動性
（3）選擇；上清液；抗原﹣抗體雜交
（4）體外（培養(yǎng)）
（5）特異性強（或“識別抗原部位專一”）
【解析】解：（1）根據題意可知，H蛋白在多種惡性腫瘤特別是乳腺癌細胞中過量表達，因此原癌基因的表達產物H蛋白在正常組織中低表達；由于抗體主要存在于細胞外液中，因此根據H蛋白的結構圖可知，若用H蛋白制備抗原需要利用胞外區(qū)基因，由制備獲得的抗體作用于該抗原的胞外區(qū)． （2）在制備單克隆抗體過程中，需要將脾臟細胞與骨髓瘤細胞融合，誘導其融合的試劑為聚乙二醇，其融合的原理是借助于細胞膜的流動性． （3）將融合細胞接種在選擇培養(yǎng)基中，從中選出雜交瘤細胞，由于抗體蛋白質相對質量較輕，又因為抗體由細胞分泌出細胞，因此需要在吸取有克隆生長的細胞培養(yǎng)孔中的上清液，利用抗原﹣抗體雜交技術最后選出產生單克隆抗體的雜交瘤細胞．（4）將雜交瘤細胞經過體外培養(yǎng)或小鼠腹腔內培養(yǎng)，獲得大量的單克隆抗體．（5）單克隆抗體的優(yōu)點是特異性強，靈敏度高． 所以答案是：（1）低表達；胞外；（2）骨髓瘤；PEG（或“聚乙二醇”）；細胞膜的流動性；（3）選擇；上清液；抗原﹣抗體雜交；（4）體外（培養(yǎng)）；（5）特異性強（或“識別抗原部位專一”）
【考點精析】認真審題，首先需要了解單克隆抗體的制備(對免疫小鼠注射特定的抗原蛋白；提取B淋巴細胞；同時用動物細胞培養(yǎng)的方法培養(yǎng)骨髓瘤細胞并提取；促使它們細胞融合；在特定的選擇培養(yǎng)基上篩選出融合的雜種細胞；然后對它進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測；最后將雜交瘤細胞在體外做大規(guī)模培養(yǎng)或注射入小鼠腹腔內增殖，從細胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中可得到大量的單克隆抗體)．