Question

【題目】干擾素是動(dòng)物或人體細(xì)胞產(chǎn)生的一種糖蛋白，具有抗病毒的作用。我國(guó)科學(xué)家成功地把人的干擾素基因“嫁接”到了煙草的DNA分子上，使煙草獲得了抗病毒的能力。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）科學(xué)家欲從人淋巴細(xì)胞的DNA中獲取干擾素基因，此時(shí)需要用到___________酶切割。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因時(shí)，進(jìn)行了n次循環(huán)的擴(kuò)增，第72次時(shí)理論上至少需要___________個(gè)引物。

（2）獲得了干擾素基因后，要構(gòu)建基因表達(dá)載體，此時(shí)需要用___________酶把干擾素與質(zhì)粒連接起來(lái)。一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了目的基因外，還必須要有___________以及標(biāo)記基因等，其中標(biāo)記基因的作用是______________________。

（3）將含有干擾素基因的基因表達(dá)載體導(dǎo)入煙草細(xì)胞中，常用的方法是___________。將干擾素基因?qū)�入煙草�?xì)胞后，要檢測(cè)___________，這是干擾素基因能否在煙草細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵。

（4）如何檢測(cè)培育的轉(zhuǎn)干擾素基因煙草是否具有抗病毒能力?_________________________________。

Answer 1

【答案】限制性核酸內(nèi)切（或限制）2nDNA連接啟動(dòng)子、終止子鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法煙草細(xì)胞的染色體DNA上是否插入了干擾素基因用病毒感染轉(zhuǎn)基因煙草，若煙草不得病，說(shuō)明煙草具有抗病毒能力；若煙草得病，說(shuō)明煙草不具有抗病毒能力

【解析】

考查了基因工程的操作程序中相關(guān)知識(shí)，考查了知識(shí)的記憶情況和應(yīng)用能力。

（1）從供體DNA上獲得目的基因用限制酶切割。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增基因時(shí)，每個(gè)DNA復(fù)制一次都需要2個(gè)引物，第n次時(shí)實(shí)際上是2n-1個(gè)DNA在復(fù)制，因此需要2n個(gè)引物。

（2）連接目的基因與運(yùn)載體使用DNA連接酶。一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了目的基因外，還必須要有啟動(dòng)子、終止子以及標(biāo)記基因等，其中標(biāo)記基因的作用是 鑒別、篩選含有目的基因的受體細(xì)胞。

（3）將含有干擾素基因的基因表達(dá)載體導(dǎo)入單子葉植物細(xì)胞中，常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。將干擾素基因?qū)�入煙草�?xì)胞后，要檢測(cè)煙草細(xì)胞的染色體DNA上是否插入了干擾素基因 ，這是干擾素基因能否在煙草細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵。

（4）用病毒感染轉(zhuǎn)基因煙草，若煙草不得病，說(shuō)明煙草具有抗病毒能力；若煙草得病，說(shuō)明煙草不具有抗病毒能力。