Question

【題目】下圖是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過程，請回答下列問題：

（1）圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以_________為唯一氮源，鑒別培養(yǎng)基還需添加_________作指示劑。

（2）對土壤樣品溶液逐級稀釋的目的是__________________，對獲得的菌種采用_________的方法進(jìn)行長期保存。

（3）在3個(gè)培養(yǎng)基平板上，分別接種0.1mL稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品液，平板上長出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為39、48和42。該過程采取的接種方法是_________，每毫升土壤樣品液中的細(xì)菌數(shù)量為_________個(gè)。用此計(jì)數(shù)方法測得的細(xì)菌數(shù)比實(shí)際細(xì)菌數(shù)要_________，原因是____________________________________。

Answer 1

【答案】尿素 酚紅 獲得單個(gè)細(xì)菌（或單個(gè)菌落） 甘油管藏 稀釋涂布平板法 4.3×107 少 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的是一個(gè)菌落

【解析】

1、由于細(xì)菌分解在尿素的過程中合成脲酶，脲酶將尿素分解成氨，會(huì)使培養(yǎng)基堿性增強(qiáng)，PH升高，所以可以用檢測pH的變化的方法來判斷尿素是否被分解，可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，尿素被分解后產(chǎn)生氨，PH升高，指示劑變紅。
2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落；
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

（1）產(chǎn)脲酶的細(xì)菌為尿素分解菌，因此圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為唯一氮源；由于細(xì)菌在分解尿素的過程中合成脲酶，脲酶將尿素分解成氨，會(huì)使培養(yǎng)基堿性增強(qiáng)，PH升高，所以可以用檢測pH的變化的方法來判斷尿素是否被分解，鑒別培養(yǎng)基還需添加酚紅作指示劑。

（2）對土壤樣品溶液進(jìn)行逐級稀釋，然后進(jìn)行涂布平板，其目的是獲得單個(gè)細(xì)菌（或單個(gè)菌落）；對獲得的菌種可以采用甘油管藏的方法進(jìn)行長期保存。

（3）結(jié)合題干實(shí)驗(yàn)過程、結(jié)合圖示分析，圖中菌落在平板上均勻分布，判斷該過程采取了稀釋涂布平板法；在3個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤溶液0.1mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為39、48、42三個(gè)平板符合計(jì)數(shù)要求，所以每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量=（39+48+42）÷3÷0.1×105= 4.3×107個(gè)；用稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)時(shí)，由于兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連接在一起時(shí)，往往統(tǒng)計(jì)的是一個(gè)菌落，故用此方法測得的細(xì)菌數(shù)偏低。