【題目】為生產(chǎn)具有特定性能的α-淀粉酶,研究人員從某種海洋細(xì)菌中克隆了α-淀粉酶基因(1 656個(gè)堿基對(duì)),利用基因工程大量制備α-淀粉酶,實(shí)驗(yàn)流程見(jiàn)下圖。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:

(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增α-淀粉酶基因前,需先獲得細(xì)菌的________

(2)為了便于擴(kuò)增的DNA片段與表達(dá)載體連接,需在引物的________端加上限制性酶切位點(diǎn),且常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制性酶切位點(diǎn),主要目的是________。

(3)進(jìn)行擴(kuò)增時(shí),反應(yīng)的溫度和時(shí)間需根據(jù)具體情況進(jìn)行設(shè)定,下列選項(xiàng)中________的設(shè)定與引物有關(guān),________的設(shè)定與擴(kuò)增片段的長(zhǎng)度有關(guān)。(填序號(hào))

①變性溫度 ②退火溫度 ③延伸溫度 ④變性時(shí)間 ⑤退火時(shí)間 ⑥延伸時(shí)間

(4)下圖表示篩選獲得的工程菌中編碼α-淀粉酶的mRNA的部分堿基序列:

圖中虛線框內(nèi)mRNA片段包含________個(gè)密碼子,如虛線框后的序列未知,預(yù)測(cè)虛線框后的第一個(gè)密碼子最多有________種。

(5)獲得工程菌表達(dá)的α-淀粉酶后,為探究影響酶活性的因素,以濃度為1%的可溶性淀粉為底物測(cè)定酶活性,結(jié)果如下:

緩沖液

50 mmol/L Na2HPO4-KH2PO4

50 mmol/L Tris-HCl

50 mmol/L Gly-NaOH

pH

6.0

6.5

7.0

7.5

7.5

8.0

8.5

9.0

9.0

9.5

10.0

10.5

酶相對(duì)活性%

25.4

40.2

49.8

63.2

70.1

95.5

99.5

85.3

68.1

63.7

41.5

20.8

根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果,初步判斷該α-淀粉酶活性最高的條件為________

【答案】 基因組DNA 5' 使DNA片段能定向插入表達(dá)載體,減少自連 8 13 pH8.5,緩沖液為50 mmol/L Tris-HCl

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】下圖表示人體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)的相關(guān)機(jī)理,請(qǐng)據(jù)圖回答:

(1)由圖可知,對(duì)甲細(xì)胞的調(diào)節(jié),既可通過(guò)神經(jīng)遞質(zhì)直接進(jìn)行調(diào)節(jié),還可通過(guò)有關(guān)激素進(jìn)行調(diào)節(jié)。原因是________。

(2)圖中A處的信號(hào)轉(zhuǎn)換過(guò)程為________________________________________

(3)若甲細(xì)胞為下丘腦細(xì)胞,當(dāng)甲狀腺激素分泌增多時(shí),甲細(xì)胞分泌的物質(zhì)會(huì)_________,這是一種____________調(diào)節(jié)機(jī)制。

(4)人體維持穩(wěn)態(tài)的主要調(diào)節(jié)機(jī)制為________________。

(5)若甲細(xì)胞為肌細(xì)胞,長(zhǎng)時(shí)間劇烈運(yùn)動(dòng)后,血漿成分會(huì)發(fā)生一些變化,圖示中________(填“C”或“B”)端乳酸含量會(huì)增加。若甲細(xì)胞為肝細(xì)胞,饑餓時(shí)圖示中______(填“C”或“B”)端血糖濃度高。原因是____________(填激素)增加,它作用于甲細(xì)胞促進(jìn)____________,使血糖維持正常水平。

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】長(zhǎng)鏈非編碼RNA(lncRNA)是長(zhǎng)度大于200個(gè)堿基,具有多種調(diào)控功能的一類RNA分子。下圖表示細(xì)胞中lncRNA的產(chǎn)生及發(fā)揮調(diào)控功能的幾種方式,請(qǐng)回答下列問(wèn)題:

(1)細(xì)胞核內(nèi)各種RNA的合成都以 為原料,催化該反應(yīng)的酶是 。

(2)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的RNA中,提供信息指導(dǎo)氨基酸分子合成多肽鏈的是 ,此過(guò)程中還需要的RNA

(3)lncRNA前體加工成熟后,有的與核內(nèi) (圖示①)中的DNA結(jié)合,有的能穿過(guò) (圖示②)與細(xì)胞質(zhì)中的蛋白質(zhì)或RNA分子結(jié)合,發(fā)揮相應(yīng)的調(diào)控作用。

(4)研究發(fā)現(xiàn),人體感染細(xì)菌時(shí),造血干細(xì)胞核內(nèi)產(chǎn)生的一種lncRNA,通過(guò)與相應(yīng)DNA片段結(jié)合,調(diào)控造血干細(xì)胞的 ,增加血液中單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等吞噬細(xì)胞的數(shù)量。該調(diào)控過(guò)程的主要生理意義是 。

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】下列關(guān)于生態(tài)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)的敘述,正確的是( )

A. 專門營(yíng)腐生生活的細(xì)菌不一定是分解者

B. 食物網(wǎng)中生物的種間關(guān)系都為捕食

C. 食物網(wǎng)中各種生物所處的營(yíng)養(yǎng)級(jí)是一成不變的

D. 生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)包括生態(tài)系統(tǒng)的成分和營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】如圖表示甲、乙兩種植物激素對(duì)月季生根的影響,下列分析正確的是( 。

A. 圖中信息表明激素甲的作用具有兩重性

B. 該實(shí)驗(yàn)的自變量為植物激素的濃度,因變量為激素種類及生根數(shù)

C. 甲、乙激素在促進(jìn)月季生根方面具有拮抗作用

D. 若研究5 μmol·L-1的甲、乙激素對(duì)月季插條生根的復(fù)合影響,應(yīng)設(shè)置3組實(shí)驗(yàn)

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】現(xiàn)有某作物種質(zhì)資源包括: ①高產(chǎn)、感; 低產(chǎn)、抗病; 高產(chǎn)、晚熟等純合品種。為滿足不同地區(qū)及不同環(huán)境條件下的栽培需求,育種專家要培育3類品種:a.高產(chǎn)、抗病;b.高產(chǎn)、早熟;c.高產(chǎn)、抗旱。下述育種方法可行的是

A. 利用、品種間雜交篩選獲得a

B. 對(duì)品種進(jìn)行染色體加倍處理篩選獲得b

C. abc的培育只能采用誘變育種的方法獲得

D. 用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將外源抗旱基因?qū)?/span>中獲得c

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】如圖表示某生物細(xì)胞不同分裂時(shí)期的模式圖,下列敘述不正確的是

A. 該生物為雌性個(gè)體

B. 甲、乙、丙三個(gè)細(xì)胞中染色體數(shù)目之比是421

C. 甲細(xì)胞所處時(shí)期的前一個(gè)時(shí)期最適合觀察染色體

D. 甲、乙、丙細(xì)胞中都有同源染色體

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】健康人一天能形成150升左右的原尿,而每天排出的尿液卻只有1.5升左右。導(dǎo)致這一現(xiàn)象的原因是

A.腎小球?qū)ρ獫{有過(guò)濾作用B.膀胱對(duì)原尿有重吸收作用

C.膀胱有儲(chǔ)存尿液的功能D.腎小管對(duì)原尿有重吸收作用

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】(題文)環(huán)境保護(hù)

戈壁紅駝屬于雙峰駝品種內(nèi)的一個(gè)品系,它是“草原五畜”( 駱駝、馬、牛、綿羊和山羊)中最能涵養(yǎng)生態(tài)的一種,紅駝走過(guò)之地,鼠害都隨之減少。特殊的生理機(jī)能使它們適應(yīng)了這里嚴(yán)酷的自然環(huán)境。紅駝吃的是‘走馬草’,這里一口那里一口,吃一頓要走幾十公里,遍地叢生的梭梭草是它們的美食。梭梭草是一種雜性惡草,繁殖速度快,需要不定期的進(jìn)行平茬。下圖示意戈壁紅駝群和雙峰駝主要分布區(qū)域。

牧民說(shuō)紅駝不是環(huán)境的破壞者,而是荒漠草原戈壁的守護(hù)者,為什么?

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