Question

19．促紅細(xì)胞生成素（EPO）是體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病．由于天然EP0來源極為有限，目前臨床使用的紅細(xì)胞生成素主要來自于基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人促紅細(xì)胞生成素（rhEPO），生產(chǎn)流程如圖，請回答下列問題：
（1）圖中①所指的技術(shù)中，需要在進(jìn)行過程中補(bǔ)充的物質(zhì)是原料和引物．圖中②所指的物質(zhì)是mRNA，檢測細(xì)胞能否表達(dá)出③的方法是抗原--抗體雜交技術(shù)．
（2）受體細(xì)胞選擇倉鼠卵巢細(xì)胞系，主要是基于這種細(xì)胞的可無限增殖特性．培養(yǎng)重組CHO 細(xì)胞時，除適宜的溫度及無菌條件外，還需要保證的環(huán)境因素是氣體條件（5%CO₂濃度），為防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害，應(yīng)定時更換培養(yǎng)液（定期換瓶）．
（3）科學(xué)家經(jīng)過努力現(xiàn)已研制出了可以口服的EPO，為培育出乳汁中含有此類EPO的轉(zhuǎn)基因牛，需選擇受精卵作為受體細(xì)胞，在操作中可能涉及的胚胎工程技術(shù)主要有體外受精、體外胚胎培養(yǎng)、胚胎移植、胚胎分割（要求填兩項）．

Answer 1

分析 據(jù)圖分析可知：①和②過程都是獲取目的基因的途徑，①是利用PCR技術(shù)短時間內(nèi)擴(kuò)增目的基因，②是通過反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因．獲得此圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人工紅細(xì)胞生成素（rhEPO）期間要生產(chǎn)流程，最終產(chǎn)物是紅細(xì)胞生成素（rhEPO），由此可推測出圖中高效表達(dá)出③的重組CHO細(xì)胞是高效表達(dá)出紅細(xì)胞生成素（rhEPO）的重組細(xì)胞．但是在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞代謝產(chǎn)物增多、PH下降、營養(yǎng)物質(zhì)逐漸減少等等因素，為了防止細(xì)胞受到傷害，應(yīng)該定期更換培養(yǎng)液．

解答 解：（1）圖中①表示利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，PCR技術(shù)過程中需要補(bǔ)充原料和引物．反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因時首先需要利用mRNA作為模板，通過逆轉(zhuǎn)錄過程合成cDNA，檢測細(xì)胞能否表達(dá)出EPO的方法是抗原--抗體雜交技術(shù)．
（2）受體細(xì)胞選擇倉鼠卵巢細(xì)胞系，主要是基于這種細(xì)胞的可無限增殖特性．培養(yǎng)重組CHO 細(xì)胞時，除適宜的溫度及無菌條件外，還需要保證一定的氣體條件（5%CO₂濃度），為防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害，應(yīng)定時更換培養(yǎng)液（定期換瓶）．
（3）科學(xué)家經(jīng)過努力現(xiàn)已研制出了可以口服的EPO，為培育出乳汁中含有此類EPO的轉(zhuǎn)基因牛，需選擇受精卵作為受體細(xì)胞，在操作中可能涉及的胚胎工程技術(shù)主要有體外受精、體外胚胎培養(yǎng)、胚胎移植、胚胎分割等．
故答案為：
（1）原料和引物    mRNA     抗原--抗體雜交
（2）可無限增殖    氣體條件（5%CO₂濃度）   定時更換培養(yǎng)液（定期換瓶）
（3）受精卵    體外受精、體外胚胎培養(yǎng)、胚胎移植、胚胎分割

點(diǎn)評 本題以“促紅細(xì)胞生成素”的合成為題材，考查基因工程、細(xì)胞工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，識記動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理及培養(yǎng)條件，能結(jié)合題中信息準(zhǔn)確答題．