Question

【題目】人組織纖溶酶原激活物（htPA)是一種重要的藥用蛋白，可在轉htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：

（1）htPA基因與載體用__________切割后，通過DIVA連接酶連接，以構建重組表達載體。檢測目的基因是否已插入受體細胞DNA，可采用____________技術。

（2）為獲取更多的卵（母）細胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其____________。采集的精子需要經(jīng)過____________，才具備受精能力。

（3）將重組表達載體導入受精卵常用的方法是_____________。為了獲得母羊，移植前需對已成功轉入目的基因的胚胎進行___________。利用胚胎分割和胚胎移植技術可獲得多個轉基因個體，這體現(xiàn)了早期胚胎細胞的______________。

（4）若在轉htPA基因母羊的羊乳中檢測到_________，說明目的基因成功表達。

Answer 1

【答案】 同種限制性核酸內(nèi)切酶(或同種限制酶) DNA分子雜交 超數(shù)排卵 獲能(處理) 顯微注射法 性別鑒定 全能性 htPA(或人組織纖溶酶原激活物)

【解析】試題分析：本題結合轉htPA基因母羊的培育過程圖，考查基因工程的相關知識，解題關鍵能識記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各步驟中的相關細節(jié)，能結合所學的知識準確答題。

（1）目的基因和運載體需用同種限制性核酸內(nèi)切酶（或同種限制酶）切割，產(chǎn)生相同的粘性末端，通過DNA連接酶連接，以構建重組表達載體。檢測目的基因是否已插入受體細胞DNA，可采用DNA分子雜交（或核酸探針）技術，原理是堿基互補配對。

（2）為獲取更多的卵（母）細胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其超數(shù)排卵。采集的精子需要經(jīng)過獲能（處理），才具備受精能力。

（3）將重組表達載體導入受精卵常用的方法是顯微注射法。為了獲得母羊，移植前需對已成功轉入目的基因的胚胎進行性別鑒定，以選擇母羊的胚胎進行移植．利用胚胎分割和胚胎移植技術可獲得多個轉基因個體，這體現(xiàn)了早期胚胎細胞的全能性。

（4）若在轉htPA基因母羊的羊乳中檢測到htPA（或人組織纖溶酶原激活物），說明目的基因成功表達。