Question

16．炭疽桿菌能引起人畜患炭疽病．對炭疽病疑似患者，可通過甲圖所示鑒定炭疽桿菌的實驗進行確診，其中實驗組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽桿菌．

（1）若要從炭疽病疑似患者體內(nèi)分離出炭疽桿菌，可將患者皮膚膿胞滲出物稀釋后滴于培養(yǎng)基表面，用無菌玻璃刮刀涂勻，該接種方法稱為涂布分離法．乙圖所示的四種菌落分布圖中，該接種方法不能得到的是D．
（2）制備甲圖中的液體培養(yǎng)基時需采取高壓蒸汽滅菌法滅菌．接種可疑菌后，需將三角瓶置于35℃下的搖床上振蕩培養(yǎng)24小時，可疑菌會大量繁殖，液體培養(yǎng)基變渾濁．
（3）甲圖中，對照組與實驗組試管同時培養(yǎng)6小時后，若實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照組低（高/低），則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除．此判斷的依據(jù)是噬菌體侵染炭疽桿菌，炭疽桿菌數(shù)量下降．

Answer 1

分析 1、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落．
2、實驗室常用的滅菌方法
①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌，此外，在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰燃燒來滅菌；
②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌；
③高壓蒸汽滅菌：培養(yǎng)基一般采用該方法進行滅菌．

解答 解：（1）根據(jù)題干信息可知，“用無菌玻璃刮刀涂勻”，表明該接種方法為稀釋涂布平板法，即為涂布分離法．分析乙圖可知，圖中ABC三個平板中菌落均均勻分布，只是菌落數(shù)不同，采用的是稀釋涂布平板法，而D平板運用了平板劃線法．
（2）培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌法滅菌．接種可疑菌后，需將三角瓶置于35℃下的搖床上振蕩培養(yǎng)24小時，可疑菌會大量繁殖，液體培養(yǎng)基變渾濁．
（3）甲圖中，實驗組中加入噬菌體液，由于噬菌體侵染炭疽桿菌，炭疽桿菌數(shù)量下降，如果實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照組低，則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除．
故答案為：
（1）涂布分離法      D
（2）高壓蒸汽滅菌     振蕩
（3）低    噬菌體侵染炭疽桿菌，炭疽桿菌數(shù)量下降

點評 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識，要求考生掌握微生物分離和純化的兩種方法，掌握無菌技術(shù)的主要內(nèi)容，能夠運用噬菌體專一性的侵染細菌的知識儲備解決疑似患者是否被炭疽桿菌感染．