Question

【題目】為研究“某品牌酸奶中乳酸菌數(shù)量及其對(duì)抗生素耐藥性情況”某同學(xué)進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn):

請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：

（1）配制的細(xì)菌培養(yǎng)基除了含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽等主要營(yíng)養(yǎng)成分外，還應(yīng)加入適量的__________和瓊脂。在培養(yǎng)基各成分溶化與滅菌之間，要進(jìn)行的操作是_________。

（2）接種微生物的方法有很多，圖中過(guò)程①②③所示的方法為_______________。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)，同時(shí)需要做A、B、C三個(gè)培養(yǎng)皿，原因是________________。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)后，所得數(shù)據(jù)需要乘以10n后，才可表示乳酸菌的數(shù)量（單位：個(gè)/ml)，這里的n=_____________。

（3）請(qǐng)完善“檢測(cè)乳酸菌對(duì)青霉素、四環(huán)素耐藥性”的實(shí)驗(yàn)操作步驟：

步驟1:分別取______________加入三組無(wú)菌培養(yǎng)皿中，滅菌并冷卻到__________℃左右的培養(yǎng)基，立即混勻，靜置凝固成平板。

步驟2:向三組培養(yǎng)基中分別接種待檢測(cè)的乳酸菌菌種。

步驟3:將接種后的三組培養(yǎng)基和一個(gè)_________都置于適宜溫度等條件下培養(yǎng)一定時(shí)間，觀察比較培養(yǎng)基中菌落生長(zhǎng)情況。

Answer 1

【答案】維生素調(diào)pH稀釋涂布平板法分別計(jì)數(shù)3次，取平均值，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠6等量的且適量的青霉素、四環(huán)素、無(wú)菌水50未接種的培養(yǎng)基

【解析】

微生物的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。微生物的純化方法有平板劃線法與稀釋涂布平板法，其中稀釋涂布法還可以用于活菌計(jì)數(shù)。分析圖解可知，圖示過(guò)程為微生物分離與純化過(guò)程中的稀釋涂布平板法，即將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

（1）配制的細(xì)菌培養(yǎng)基除了含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽等主要營(yíng)養(yǎng)成分外，還應(yīng)加入適量的微生素和瓊脂。在培養(yǎng)基各成分溶化與滅菌之間，要先調(diào)pH。

（2）接種微生物的方法有很多,其中主要有平板劃線法與稀釋涂布平板法，圖中過(guò)程①②③所示的方法為稀釋涂布平板法。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)，同時(shí)需要做A、B、C三個(gè)培養(yǎng)皿，分別計(jì)數(shù)3次，取平均值，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)后，所得數(shù)據(jù)需要乘以10n后才可表示乳酸菌的數(shù)量（單位：個(gè)/mL）。分析圖解可知，圖中酸奶樣品總共稀釋105倍，并且稀釋涂布平板時(shí)只取了0.1ml，因此這里的n=6。

（3）步驟1：根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康目芍�該�?shí)驗(yàn)的自變量是青霉素、四環(huán)素的有無(wú)，結(jié)合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的等量原則，應(yīng)該分別取等量的青霉素、四環(huán)素和無(wú)菌水加入三組無(wú)菌培養(yǎng)皿中。滅菌并冷卻到50℃左右的培養(yǎng)基，立即混勻，靜置凝固成平板。步驟3：根據(jù)對(duì)照原則，且為了檢測(cè)培養(yǎng)基滅菌是否合格，應(yīng)該將接種后的三組培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基都置于適宜溫度等條件下培養(yǎng)培養(yǎng)一定時(shí)間，觀察比較培養(yǎng)基中菌落生長(zhǎng)情況。