Question

【題目】某實驗小組對微生物的培養(yǎng)和五種香辛料萃取提取的精油（編號為A、B、C、D、E）抑菌能力進行了研究。首先制備了直徑為8mm的圓濾紙片若干，滅菌后分別放入各組精油中浸泡2h。然后取各種待測菌懸液各0．1mL分別在相應(yīng)的固體培養(yǎng)基上均勻涂布，制成含菌平板。再取浸泡過精油的濾紙片貼在含菌平板上，每個培養(yǎng)皿貼浸過同一種精油的濾紙3片。放培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一定時間，測定抑菌圈直徑，結(jié)果取三次重復(fù)實驗的平均值，其數(shù)據(jù)如下表所示：

精油種類 抑菌圈直徑（mm） 菌種	A	B	C	D	E
大腸桿菌	21．1	26．0	15．1	24．0	23．2
白葡萄球菌	14．7	22．0	19．1	12．0	29．1
酵母菌	24．6	33．0	26．0	24．5	49．6
青霉	25．3	38．2	24．3	25．1	42．8

（1）培養(yǎng)不同的微生物所需的pH和溫度往往不同，在培養(yǎng)霉菌時需要將培養(yǎng)基的pH值調(diào)至______________（填“酸性”、“堿性”、“中性或微堿性”）。培養(yǎng)細菌的溫度一般______________（填“低于”或“高于”）培養(yǎng)霉菌的溫度。

（2）萃取精油時蒸餾過程中需要控制蒸餾的溫度和時間，原因是______________。

（3）本實驗中采用了______________操作接種。結(jié)果可見不同精油對不同種類的微生物殺傷作用不同，C和E對細菌的殺傷作用______________（填“大于”或“小于”）對真菌的殺傷作用。

（4）若用固定酶技術(shù)固定酵母菌中的酶，和一般酶制劑相比，其優(yōu)點是______________。固定化酵母細胞常用______________法固定化。

（5）有同學(xué)認為缺少關(guān)于五種精油是否抗病毒的實驗結(jié)果，提出在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上接種常見的病毒進行實驗。你認為可以嗎？為什么？________________________________________________________。

Answer 1

【答案】酸性 高于 如果蒸餾溫度太高，時間太短，產(chǎn)品品質(zhì)就比較差 稀釋涂布平板 小于 利于產(chǎn)物的純化，同時固定在載體上的酶還可以被反復(fù)利用 包埋 不可以，病毒為寄生生物，在該培養(yǎng)基上不能生長

【解析】

各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細菌時需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時則需要提供無氧的條件。細菌一般在30～37℃的溫度下培養(yǎng)l～2d，放線菌一般在25～28℃的溫度下培養(yǎng)5～7d，霉菌一般在25～28℃的溫度下培養(yǎng)3～4d。

（1）根據(jù)上述分析可知，在培養(yǎng)霉菌時需要將培養(yǎng)基的PH值調(diào)至酸性。培養(yǎng)細菌的溫度一般高于培養(yǎng)霉菌的溫度。

（2）如果蒸餾溫度太高，時間太短，產(chǎn)品品質(zhì)就比較差，所以萃取精油時蒸餾過程中需要控制蒸餾的溫度和時間。

（3）本實驗中是將各種待測菌懸液各0．1mL分別在相應(yīng)的固體培養(yǎng)基上均勻涂布，即采用了稀釋涂布平板法接種。表格中不同精油對不同種類的微生物殺傷作用不同，大腸桿菌和白葡萄球菌為細菌，酵母菌和青霉為真菌，C和E對細菌產(chǎn)生的抑菌圈小于真菌的抑菌圈，說明C和E對細菌的殺傷作用小于對真菌的殺傷作用。

（4）固定化酶技術(shù)固定酵母菌中的酶，和一般酶制劑相比，其優(yōu)點是可重復(fù)利用，且利于產(chǎn)物的純化。由于細胞個體大，不易被吸附和結(jié)合，所以固定化酵母細胞常用包埋法固定化。

（5）由于病毒為寄生生物，不能獨立代謝，在該培養(yǎng)基上不能生長，所以不能在瓊脂培養(yǎng)基上接種常見的病毒進行實驗。