Question

【題目】在藥品生產(chǎn)中，人們逐步利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)出如干擾素，白細(xì)胞介素，凝血因子等各種高質(zhì)量低成本的藥品，請(qǐng)分析回答：

(1)在用目的基因與質(zhì)粒形成重組DNA過(guò)程中，一般要用到的工具酶是限制酶和DNA連接酶，其中限制酶切割的是___________________鍵,其特點(diǎn)是___________________________。

(2)將含有“某激素基因”的質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌細(xì)胞后，能在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)直接合成“某激素”，則該激素在細(xì)菌體內(nèi)的合成包括______________________和_________________兩個(gè)階段。

(3)基因工程形成工程菌的遺傳學(xué)原理是______________________________。

(4) 基因工程操作的第四步是目的基因的檢測(cè)與鑒定，其中分子水平的檢測(cè)又分三步：首先要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的DNA是否插入了目的基因，采用技術(shù)是______________________；其次還要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是____________________________；最后檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是__________________________________________。

(5)為了解基因結(jié)構(gòu)，通常選取一特定長(zhǎng)度的線性DNA分子，先用一種限制酶切割，通過(guò)某種技術(shù)將單酶水解片段分離，計(jì)算相對(duì)大�。蝗缓笤儆昧硪环N酶對(duì)單酶水解片段進(jìn)行降解，分析片斷大小。下表是某小組進(jìn)行的相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

已知一線性DNA序列共有5000bp（bp為堿基對(duì)）	第一步水解	產(chǎn)物（單位bp）	第二步水解	產(chǎn)物（單位bp）
	A酶切割	1900	將第一步水解產(chǎn)物分離后，分別用B酶切割	1700 200
		1500		800 700
		1600		1100 500

由實(shí)驗(yàn)可知，在這段已知序列上，A酶與B酶的識(shí)別序列分別為______個(gè)和_____個(gè)。

Answer 1

【答案】 磷酸二酯鍵 只能識(shí)別特定的DNA序列,并在兩個(gè)特定的脫氧核苷酸之間切割 轉(zhuǎn)錄 翻譯 基因重組 DNA分子雜交技術(shù) 采用分子雜交技術(shù) 抗原—抗體雜交 2 3

【解析】試題分析：制性核酸內(nèi)切酶是可以識(shí)別DNA的特異序列，并在識(shí)別位點(diǎn)或其周圍切割雙鏈DNA的一類內(nèi)切酶，簡(jiǎn)稱限制酶。由表格分析可知A酶切割后有3段產(chǎn)物，說(shuō)明酶A有2個(gè)切割位點(diǎn)，A酶切割的每一段產(chǎn)物，能被B酶切割位2段產(chǎn)物，說(shuō)明每一段產(chǎn)物酶B有1個(gè)切割位點(diǎn)，因此說(shuō)明酶B有3個(gè)切割位點(diǎn)。

（1）限制酶切割的是磷酸二酯鍵，其特點(diǎn)是只能識(shí)別特定的DNA序列，并在兩個(gè)特定的脫氧核苷酸之間切割。

（2）將含有“某激素基因”的質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌細(xì)胞后，能在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)直接合成“某激素”，說(shuō)明該激素的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)的合成包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)階段。

（3）基因工程形成工程菌的遺傳學(xué)原理是基因重組。
（4）基因工程操作的第四步是目的基因的檢測(cè)與鑒定，其中分子水平的檢測(cè)又分三步：首先要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的DNA是否插入了目的基因，采用技術(shù)是DNA分子雜交技術(shù)；其次還要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是采用分子雜交技術(shù)；最檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是抗原-抗體雜交。

（5）由實(shí)驗(yàn)可知，A酶切割后形成3段產(chǎn)物，所以有2個(gè)識(shí)別位點(diǎn)，被A酶切割后的3段產(chǎn)物，被B酶切割后形成6段，所以酶B的識(shí)別序列有3個(gè)。