Question

【題目】研究人員用四倍體馬鈴薯（4n=48）和抗青枯病的野生型二倍體馬鈴薯（2n=24）進(jìn)行體細(xì)胞雜交，培育抗青枯病的馬鈴薯。

（1）研究人員用四倍體馬鈴薯的葉片拆究原生質(zhì)體制備條件，結(jié)果如表所示：

組別	酶的種類(lèi)	酶的濃度	原生質(zhì)體產(chǎn)量 （×106個(gè)/g）	鏡檢結(jié)果
1	纖維素酶	1.0	0.4	未解離的細(xì)胞團(tuán)多
	果膠酶	0.5
2	纖維素酶	1.0	0.08	有許多碎片
	果膠酶	1.0
3	纖維素酶	0.5	1.5	未完全解離
	果膠酶	0.5
4	纖維素酶	0.5	3.4	解離較好，細(xì)胞破碎嚴(yán)重
	果膠酶	1.0
5	纖維素酶	0.4	18.8	解離充分，碎片少
	果膠酶	0.7

①據(jù)表分析，制備原生質(zhì)體的最佳組合是第__________組，葉片解離程度主要取決于__________的濃度。

②制備的原生質(zhì)體應(yīng)置于濃度__________馬鈴薯葉片細(xì)胞液濃度的溶液中進(jìn)行培養(yǎng)，以保持原生質(zhì)體的正常形態(tài)。

（2）為了便于在顯微鏡下對(duì)雜種細(xì)胞進(jìn)行鏡檢篩選，將用四倍體馬鈴薯葉片制備的原生質(zhì)體與用野生型二倍體馬鈴薯的__________（填“葉片”或“幼根”）為材料制備的原生質(zhì)體進(jìn)行融合。把兩種原生質(zhì)體置于加入__________的溶液中促融。

（3）為進(jìn)一步從染色體水平上檢測(cè)雜種植株，科學(xué)家選取雜種植株根尖進(jìn)行__________后用堿性染料染色并制片，顯微鏡下對(duì)__________期的細(xì)胞進(jìn)行染色體計(jì)數(shù)。

（4）為達(dá)到育種目標(biāo)，還需要對(duì)雜種植株進(jìn)行__________抗性檢測(cè)以篩選得到抗性馬鈴薯新種。

Answer 1

【答案】 5 果膠酶 略高于 幼根 PEG（或“聚乙二醇”） 解離、漂洗 有絲分裂中 青枯病

【解析】試題分析：分析圖表，第1組和第2組、第3組和第4組的纖維素酶濃度相同，果膠酶濃度不同，實(shí)驗(yàn)結(jié)果原生質(zhì)的產(chǎn)量不同，故葉片解離程度主要取決于果膠酶的濃度。

（1）①據(jù)表分析，制備原生質(zhì)體的最佳組合是第5組，根據(jù)第1組和第2組、第3組和第4組的纖維素酶濃度相同，果膠酶濃度不同，實(shí)驗(yàn)結(jié)果原生質(zhì)的產(chǎn)量不同，可知：葉片解離程度主要取決于果膠酶的濃度。
②制備的原生質(zhì)體應(yīng)置于濃度或略高于馬鈴薯葉片細(xì)胞液濃度的溶液中進(jìn)行培養(yǎng)，以保持原生質(zhì)體的正常形態(tài)。
（2）可根據(jù)染色體的形態(tài)和數(shù)目對(duì)雜種細(xì)胞進(jìn)行鏡檢篩選，將用四倍體馬鈴薯葉片制備的原生質(zhì)體與用野生型二倍體馬鈴薯的幼根為材料制備的原生質(zhì)體進(jìn)行融合。（幼根有分裂增殖能力，能觀察到染色體）把兩種原生質(zhì)體置于加入PEG（或“聚乙二醇”）的溶液中促融。
（3）為進(jìn)一步從染色體水平上檢測(cè)雜種植株，科學(xué)家選取雜種植株根尖進(jìn)行解離、漂洗后用堿性染料染色并制片，顯微鏡下對(duì)有絲分裂中期的細(xì)胞進(jìn)行染色體計(jì)數(shù)。
（4）為達(dá)到育種目標(biāo)，還需要對(duì)雜種植株進(jìn)行青枯病抗性檢測(cè)以篩選得到抗性馬鈴薯新種。