Question

【題目】如圖為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法示意圖。請回答以下問題：

(1)圖中①過程用到的工具酶的特點(diǎn)是________________。

(2)圖中②過程用到的工具酶是____________，該過程是基因工程最核心的步驟，即____________。

(3)圖中③過程，需使用________溶液處理農(nóng)桿菌使其成為感受態(tài)。

(4)圖中④過程的原理是____________。

(5)檢測基因工程是否成功。首先，應(yīng)檢測________________________________，這是目的基因能否在真核細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵；其次，利用____________法檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出相應(yīng)的mRNA；最后，利用____________法檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)。

Answer 1

【答案】能識別特定的脫氧核苷酸序列并且在特定位點(diǎn)切開DNA分子 DNA連接酶 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 氯化鈣 植物細(xì)胞的全能性 轉(zhuǎn)基因生物的染色體上是否插入目的基因 分子雜交 抗原—抗體雜交

【解析】

據(jù)圖分析，①過程表示切割質(zhì)粒，產(chǎn)生粘性末端；②過程表示構(gòu)建基因表達(dá)載體；③過程表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞（農(nóng)桿菌）；④過程表示植物組織培養(yǎng)。

（1）①過程表示用限制酶切割質(zhì)粒產(chǎn)生粘性末端的過程，該過程使用的限制酶能識別特定的脫氧核苷酸序列并且在特定位點(diǎn)切開DNA分子。

（2）②過程表示構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程，是基因工程的核心步驟，該過程需要DNA連接酶將外源基因（目的基因）與質(zhì)粒連接起來。

（3）圖中③過程，將目的基因?qū)�入微生物（農(nóng)桿菌）細(xì)胞常用感受態(tài)轉(zhuǎn)化法，即用氯化鈣溶液處理該細(xì)菌，處理的目的是使該細(xì)菌處于感受態(tài)。

（4）④過程表示植物組織培養(yǎng)，其原理是植物細(xì)胞的全能性。

（5）目的基因分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。