染色時用的0.01 g·mL-1的龍膽紫溶液或醋酸洋紅液屬于( )
A.生活狀態(tài) B.已經(jīng)死亡
C.活體染色劑 D.死體堿性染料
科目:高中生物 來源:2011-2012學(xué)年江蘇省高三模擬考試(十)生物試卷(解析版) 題型:綜合題
(6分)下圖是動物細(xì)胞工程過程中相關(guān)的技術(shù)操作過程,請據(jù)圖回答下列問題:
(1) 在操作一中,為了使細(xì)胞彼此分離,通常是先用剪刀剪碎組織,再用消化法將細(xì)胞分開,消化法用的消化酶是胰蛋白質(zhì)酶,或膠原酶。研究表明膠原蛋白酶和胰蛋白酶在消化時的機制有差異,下表為兩種酶活性的比較表。
項目 |
胰蛋白酶 |
膠原酶 |
消化特性 |
適用于消化軟組織 |
適用于消化纖維多的組織 |
用量 |
0.01%~0.5% |
0.1~0.3 mg/ml |
消化時間 |
0.5~2小時 |
1~12小時 |
pH |
8~9 |
6.5~7.0 |
作用強度 |
強烈 |
緩和 |
細(xì)胞影響 |
時間過長時有影響 |
時間長時無大影響 |
動物血清 |
有抑制作用 |
無抑制作用 |
Ca2+和Mg2+ |
有抑制作用 |
無抑制作用 |
據(jù)表中信息可知胰蛋白質(zhì)酶作用時間需限制在0.5~2小時,原因是____________________________________,為了控制胰蛋白酶的消化作用時間,常用消化臨界時向溶液中直接加入________即可使酶滅活而終止消化。操作一的原理是__________________。
(2) 動物細(xì)胞培養(yǎng)液配制好后,通常還要先抽取少許放入培養(yǎng)瓶中,置于37℃、CO2培養(yǎng)箱中24小時后觀察,這樣做的目的是__________________________。
(3) 在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中通常要對細(xì)胞進行計數(shù),計數(shù)的細(xì)胞數(shù)應(yīng)為活細(xì)胞數(shù)。某同學(xué)在細(xì)胞培養(yǎng)的一次測定中,首先振蕩搖勻培養(yǎng)液并立即吸細(xì)胞懸液少數(shù)向一試管中滴入細(xì)胞懸液9滴,再滴入臺盼藍(活細(xì)胞染液)1滴,混勻。再從試管中取混合液向計數(shù)板邊緣輕輕滴1~2滴已染色的細(xì)胞懸液,使之充滿計數(shù)板和蓋玻片之間間隙,經(jīng)測定計數(shù)室每小格中活細(xì)胞數(shù)平均為3個,則原每毫升培養(yǎng)液中含有的活細(xì)胞數(shù)應(yīng)為________個。
(4) 科研人員研究發(fā)現(xiàn)某一種抗原刺激機體后,在鼠體內(nèi)可發(fā)現(xiàn)有多種效應(yīng)B細(xì)胞都可產(chǎn)生針對于該特定抗原的抗體,這些抗體混合在一起即為多克隆抗體。試從抗原結(jié)構(gòu)的角度分析產(chǎn)生該現(xiàn)象的原因是____________________________________。
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科目:高中生物 來源:2011-2012學(xué)年上海市浦東新區(qū)高三第三次模擬生物試卷(解析版) 題型:綜合題
(12分)回答下列生命科學(xué)實驗的問題。
洋蔥(2n=16)為二倍體植物。為比較不同處理方法對洋蔥根尖細(xì)胞分裂指數(shù)(即視野內(nèi)分裂期細(xì)胞數(shù)占細(xì)胞總數(shù)的百分比)的影響,某研究性學(xué)習(xí)小組進行了相關(guān)實驗,步驟如下。
①將洋蔥的老根去除,經(jīng)水培生根后取出。
②將洋蔥分組同時轉(zhuǎn)入濃度為0.01%、0.1%秋水仙素溶液中,分別培養(yǎng)24h、36h、48h;秋水仙素處理停止后再轉(zhuǎn)入清水中分別培養(yǎng)0h、12h、24h、36h。
③剪取根尖,用卡諾固定液(用3份無水乙醇、1份冰乙酸混勻)固定8h,然后將根尖浸泡在1mol/L鹽酸溶液中5~8min。
④將根尖取出,放入盛有清水的培養(yǎng)皿中漂洗。
⑤用石碳酸-品紅試劑染色。
⑥制片、鏡檢;計數(shù)、拍照。
不同方法處理后的細(xì)胞分裂指數(shù)(%)如下表,分析回答問題。
秋水仙素溶液濃度(%) |
分裂指數(shù) (%) 時間(h) |
清水培養(yǎng)時間(h) |
|||
0 |
12 |
24 |
36 |
||
0.01 |
24 |
10.71 |
13.68 |
14.19 |
14.46 |
36 |
9.94 |
11.99 |
13.59 |
13.62 |
|
48 |
7.98 |
10.06 |
12.22 |
11.97 |
|
0.1 |
24 |
7.74 |
9.09 |
11.07 |
10.86 |
36 |
6.12 |
7.87 |
9.98 |
9.81 |
|
48 |
5.97 |
6.68 |
7.98 |
8.56 |
1.步驟③中“將根尖浸泡在1mol/L鹽酸溶液中”的作用是 。
2.步驟⑥為了獲得相應(yīng)的觀察視野,鏡檢時正確的操作方法是 。
3.根據(jù)所學(xué)的知識推測,石碳酸-品紅試劑是1種 性染料。
4.為了統(tǒng)計數(shù)據(jù)更加科學(xué),計數(shù)時應(yīng)采取的方法是 。
5.根據(jù)上表結(jié)果可以得出如下初步結(jié)論:
①濃度為 秋水仙素溶液誘導(dǎo)后的細(xì)胞分裂指數(shù)較高。
②本實驗的各種處理中,提高細(xì)胞分裂指數(shù)的最佳方法是
③若只考慮處理過程中的1個變量,如設(shè) 為自變量,在
條件下,測得細(xì)胞分裂指數(shù)(%)用柱形圖表示。(2分)
6.右上方是學(xué)生在步驟⑥所拍攝的顯微照片,部分細(xì)胞染色體加倍最可能的原因是
(2分)。
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科目:高中生物 來源:2011-2012學(xué)年陜西省高三第三次月考生物試卷(解析版) 題型:綜合題
洋蔥(2n=16)為二倍體植物。為比較不同處理方法對洋蔥根尖細(xì)胞分裂指數(shù)(即視野內(nèi)分裂期細(xì)胞數(shù)占細(xì)胞總數(shù)的百分比)的影響,某研究性學(xué)習(xí)小組進行了相關(guān)實驗,實驗步驟如下:
①將洋蔥的老根去除,經(jīng)水培生根后取出。
②將洋蔥分組同時轉(zhuǎn)入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0. 01%、0. 1%秋水仙素溶液中,分別培養(yǎng)24 h、36 h、
48 h;秋水仙素處理停止后再轉(zhuǎn)入清水中分別培養(yǎng)0 h、12 h、24 h、36 h。
③剪取根尖,用Carnoy固定液(用3份無水乙醇、1份冰乙酸混勻)固定8h,然后將根尖浸泡在1 mol/L鹽酸溶液中5~8 min。
④將根尖取出,放入盛有清水的培養(yǎng)皿中漂洗。
⑤用石炭酸一品紅試劑染色。
⑥制片、鏡檢;計數(shù)、拍照。
實驗結(jié)果:不同方法處理后的細(xì)胞分裂指數(shù)(%)如下表。
秋水仙素溶液處理 |
清水培養(yǎng)時間(h) |
||||
質(zhì)量分?jǐn)?shù)(%) |
時間(h) |
0 |
12 |
24 |
36 |
0. 0l[ |
24 |
10. 71 |
13. 68 |
14. 19 |
14. 46 |
36 |
9. 94 |
11. 99 |
13. 59 |
13. 62 |
|
48 |
7. 98 |
10. 06 |
12. 22 |
11. 97 |
|
0.1 |
24 |
7. 74 |
9. 09 |
11. 07 |
10. 86 |
36 |
6. 12 |
7. 87 |
9. 98 |
9. 81 |
|
48 |
5. 97 |
6. 68 |
7. 98 |
8. 56 |
請分析上述實驗,回答有關(guān)問題:
(1)步驟③中“將根尖浸泡在1 mol/L鹽酸溶液中”的作用是 。
(2)步驟⑥為了獲得相應(yīng)的觀察視野,鏡檢時正確的操作方法是 。
(3)根據(jù)所學(xué)知識推測,石炭酸一品紅試劑是一種 性染料。
(4)為了統(tǒng)計數(shù)據(jù)更加科學(xué),計數(shù)時應(yīng)采取的方法是 。
(5)根據(jù)上表結(jié)果可以得出如下初步結(jié)論:
①質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 秋水仙素溶液誘導(dǎo)后的細(xì)胞分裂指數(shù)較高;
②本實驗的各種處理中,提高細(xì)胞分裂指數(shù)的最佳方法是 。
(6)右面為一位同學(xué)在步驟⑥所拍攝的顯微照片,形成細(xì)胞a的最可能的原因是 。
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科目:高中生物 來源:2011年江蘇省高二年級質(zhì)量檢測生物試卷 題型:綜合題
現(xiàn)有甲、乙兩種可能有一定毒性的化學(xué)物質(zhì),實驗室研究人員欲通過動物細(xì)胞培養(yǎng)的方法來鑒定它們是否有毒性并比較二者毒性的高低。請你以一個研究人員的身份參與此項研究,完成下列有關(guān)試驗:
試驗原理:有毒物質(zhì)會使動物細(xì)胞發(fā)生染色體變異,根據(jù)這種變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)(一下稱Q值),可判斷該化學(xué)物質(zhì)的毒性的高低。
材料用具:活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、動物細(xì)胞培養(yǎng)液、動物細(xì)胞固定液、適宜濃度的龍膽紫溶液、適宜濃度的化學(xué)物質(zhì)甲溶液、適宜濃度的化學(xué)物質(zhì)乙溶液、蒸餾水、滴管、培養(yǎng)皿、剪刀、錐形瓶、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、顯微鏡、小白鼠正常有絲分裂各時期的高倍顯微鏡照片。
試驗步驟:
(1)制備細(xì)胞懸浮液:
把活的小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎,轉(zhuǎn)入錐形瓶中,加入 液處理,使胚胎組織離散成單個細(xì)胞,再加入動物細(xì)胞培養(yǎng)液,制成細(xì)胞懸浮液。
(2)進行細(xì)胞培養(yǎng),觀察甲、乙兩種物質(zhì)的毒性有無及高低:
①取3個潔凈的培養(yǎng)瓶,編號A、B、C,然后依次加入 。
②向A、B兩個培養(yǎng)瓶中分別加入等量的適宜濃度的甲、乙溶液,C瓶中加入 ,振蕩、搖勻。
③把3個培養(yǎng)瓶放在37度(或適宜溫度)的恒溫箱中培養(yǎng)。
(3)制作臨時裝片:
①當(dāng)細(xì)胞增殖到大約8代左右時,同時從恒溫箱中取出3個培養(yǎng)瓶,再一次用 液處理,然后加入動物細(xì)胞固定液,迅速殺死細(xì)胞并固定細(xì)胞分裂相。
②靜置一段時間后,分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細(xì)胞懸浮液,滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號的載玻片的中央,加2滴 進行染色,3—5min后,蓋上蓋玻片。
(4)鏡檢和統(tǒng)計:
把臨時裝片放在顯微鏡下,先用低倍鏡觀察,然后再用高倍鏡,尋找處于有絲分裂
期的細(xì)胞,并與小白鼠正常細(xì)胞有絲分裂同一時期高倍顯微照片進行對比,統(tǒng)計并計算該期變異的細(xì)胞占該細(xì)胞總數(shù)的百分?jǐn)?shù)并做好記錄(Q值)。
結(jié)果分析與結(jié)論:
(1)在試驗中,C培養(yǎng)瓶起 作用。
(2)經(jīng)研究人員試驗得知,A、B、C三個培養(yǎng)瓶的Q值依次為:QA=1.3%,QB=12.5%.
QC=0.01%,由此可得出該試驗的結(jié)論是 。
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