Question

5．牛和山羊的瘤胃中有能降解尿素的細菌，某生物興趣小組為驗證該菌對尿素是否有分解作用進行實驗，制作培養(yǎng)基中的物質溶解后，用蒸餾水定容至l000mL．回答下列問題：
（1）為了將牛和山羊的瘤胃中降解尿素的細菌進行分離，培養(yǎng)基中的碳源是葡萄糖；培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選目的菌．
（2）研究人員對牛和山羊的瘤胃中的微生物取樣后，進行了系列梯度的稀釋，倍數為10〜10⁷，稀釋后將稀釋倍數為10⁵、10⁶和10⁷的稀釋液分別涂布在三個平板上，并每個稀釋倍數各設置一組接種等量菌液的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基．
①則該同學共需要設置12個培養(yǎng)基，設置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基做為對照的目的是判斷該培養(yǎng)基是否起到選擇培養(yǎng)的作用．
②若稀釋倍數為10⁵倍的三個平板中的菌落數分別為8、10、11，則不能（填“能”或“不能”）直接用該稀釋倍數下的測量數據進行計數，正確的做法是取更低稀釋倍數的菌液進行涂布，直到培養(yǎng)基的菌落數在30〜300之間．
（3）以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基培養(yǎng)“目的菌”后，加入酚紅指示劑后變紅色，能說明“目的菌”能分解尿素的原因是細菌合成的脲酶將尿素分解為氨，pH增高，使酚紅指示劑變紅．

Answer 1

分析 1、微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求．對異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是起單一方面的作用．
2、稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經培養(yǎng)后可形成單個菌落．稀釋涂布平板法進行計數時，應選擇30-300的菌落數進行計數．
3、如果要分離土壤中能分解尿素的細菌，應選擇以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基；在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，細菌合成的脲酶將尿素分解為氨，PH增高，使指示劑變紅色．

解答 解：（1）為了將牛和山羊的瘤胃中降解尿素的細菌進行分離，由于該細菌屬于異養(yǎng)型生物，培養(yǎng)基中的碳源是葡萄糖，氮源是尿素，培養(yǎng)基中加入尿素可以篩選目的菌．
（2）①根據題意可知，“將稀釋倍數為10⁵、10⁶和10⁷的稀釋液分別涂布在三個平板上”，即3×3=9個培養(yǎng)基，又由于“每個稀釋倍數各設置一組接種等量菌液的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基”，即再加3個培養(yǎng)基，則該同學共需要設置12個培養(yǎng)基，設置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基做為對照的目的是判斷該培養(yǎng)基是否起到選擇培養(yǎng)的作用．
②稀釋涂布平板法進行計數時，應選擇30-300的菌落數進行計數．若稀釋倍數為10⁵倍的三個平板中的菌落數分別為8、10、11，不能直接用該稀釋倍數下的測量數據進行計數，應取更低稀釋倍數的菌液進行涂布，直到培養(yǎng)基的菌落數在30〜300之間．
（3）在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，細菌合成的脲酶將尿素分解為氨，PH增高，使指示劑變紅色．
故答案為：
（1）葡萄糖      篩選目的菌
（2）①12     判斷該培養(yǎng)基是否起到選擇培養(yǎng)的作用
②不能   取更低稀釋倍數的菌液進行涂布，直到培養(yǎng)基的菌落數在30〜300之間
（3）酚紅   細菌合成的脲酶將尿素分解為氨，pH增高，使酚紅指示劑變紅

點評 本題考查了微生物分離與培養(yǎng)的有關知識知識，要求考生能夠掌握微生物常見的接種的方法，掌握對照實驗的原則，識記尿素分解菌鑒定的方法以及顏色反應等．