Question

如圖是利用基因工程技術生產(chǎn)人胰島素的操作過程示意圖，請據(jù)圖作答．

（1）構建基因工程表達載體時，用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產(chǎn)生粘性末端，也可能產(chǎn)生

 

末端．過程②必需的酶是

 

酶，過程③必需的酶是

 

酶．
（2）在利用AB獲得C的過程中，必須用

 

切割A和B，使它們產(chǎn)生相同的粘性末端，再加入

 

，才可形成C．利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時，構建的表達載體含有人胰島素基因及其啟動子等，其中啟動子的作用是

 

．
（3）為使過程⑧更易進行，可用

 

（藥劑）處理D．
（4）為了檢測胰島素基因是否轉錄出了mRNA，可用標記的胰島素基因片段作探針與mRNA雜交，該雜交技術稱為

 

．為了檢測胰島素基因請轉錄的mRNA是否翻譯成

 

，常用抗原-抗體雜交技術．
（5）如果要將某目的基因通過農桿菌傳話法導入植物細胞，先要將目的基因插入農桿菌Ti質粒的

 

中，然后通過農桿菌轉化作用將目的基因插入植物細胞的

 

上．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術

專題：

分析：分析題圖：圖示是利用基因工程技術生產(chǎn)胰島素的操作過程示意圖．圖中①表示從胰島B細胞中獲取胰島素mRNA的過程；②為逆轉錄過程，A為胰島素基因；③④⑤表示目的基因的擴增過程；⑥表示用限制酶切割運載體形成黏性末端的過程；⑦表示基因表達載體的構建過程；⑧表示將目的基因導入受體細胞的過程；⑨表示目的基因隨著受體細胞的增殖和擴增；⑩是從培養(yǎng)液中獲取胰島素的過程．

解答： 解：（1）構建基因工程表達載體時，用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產(chǎn)生粘性末端，也可能產(chǎn)生平末端．過程②逆轉錄必需的酶是逆轉錄酶，過程③DNA雙鏈打開必需的酶是解旋酶．
（2）構建基因表達載體的過程中，必須用相同的限制酶切割A（含目的基因的外源DNA分子）和B（運載體）以產(chǎn)生相同的黏性末端，再加入DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成C（重組DNA分子）．利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時，構建的表達載體含有人胰島素基因及其啟動子等，其中啟動子的作用是RNA聚合酶識別和結合部位，驅動基因轉錄．
（3）⑧是將目的基因導入受體細胞的過程，當受體細胞是微生物細胞時，常采用感受態(tài)細胞法，即用CaCl₂處理微生物細胞使其成為易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)細胞，從而將目的基因導入受體細胞．
（4）為了檢測胰島素基因是否轉錄出了mRNA，可用標記的胰島素基因片段作探針與mRNA雜交，該雜交技術稱為DNA分子雜交技術．為了檢測胰島素基因請轉錄的mRNA是否翻譯成蛋白質，常用抗原-抗體雜交技術．
（5）如果要將某目的基因通過農桿菌傳話法導入植物細胞，先要將目的基因插入農桿菌Ti質粒的T-DNA中，然后通過農桿菌轉化作用將目的基因插入植物細胞的染色體DNA上．
故答案為：
（1）平        逆轉錄       解旋
（2）同一種限制性內切酶       DNA連接酶       RNA聚合酶識別和結合部位，驅動基因轉錄
（3）CaCl₂ 
（4）DNA分子雜交技術　   　蛋白質
（5）T-DNA　    染色體DNA

點評：本題結合利用基因工程技術生產(chǎn)胰島素的操作過程示意圖，考查基因工程等相關知識，要求考生識記基因工程的工具及操作步驟，能準確判斷圖中各過程或物質的名稱，運用所學的知識答題，難度適中．