Question

10．黑麥草具有抗除草劑草甘麟的能力，是因為黑麥草擁有編碼抗草甘麟酶的基因．科學(xué)家利用該基因．通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了抗除草劑草甘磷的玉米新品種．培育新品種過程中用到了PCR技術(shù)（如圖所示），請回答下列問題：
（1）通過反轉(zhuǎn)錄法得到cDNA文庫，從中選取抗草甘磷酶的基因．該方法獲得的目的基因缺少基因表達所需的調(diào)控序列，即啟動子．
（2）體外獲得大量編碼抗草甘麟酶的基因要利用PCR技術(shù)，該技術(shù)所依據(jù)的原理為DNA雙鏈復(fù)制，圖中物質(zhì)A是引物，B酶是Taq（或“耐高溫的DNA聚合”）．
（3）將目的基因?qū)�入植物細胞有多種方法，最常用的是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
（4）若需要對轉(zhuǎn)入抗草甘麟基因的玉米進行個體生物學(xué)水平的鑒定，需要對玉米做噴灑草甘膦操作．
（5）若實驗結(jié)果不理想，為了提高抗草甘麟酶活性，可以通過蛋白質(zhì)工程設(shè)計和改造編碼抗草甘麟酶的基因．

Answer 1

分析 解答本題需識記有關(guān)PCR技術(shù)的相關(guān)知識：
1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應(yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)．
2、原理：DNA復(fù)制．
3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物．
4、過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開．

解答 解：（1）通過反轉(zhuǎn)錄法得到cDNA 文庫，從中選取抗草甘磷酶的基因．采用反轉(zhuǎn)錄的方法得到的目的基因沒有啟動子、終止子．
（2）體外獲得大量編碼抗草甘麟酶的基因要利用PCR技術(shù)，PCR技術(shù)以解開的雙鏈作為模版，利用的原理是DNA復(fù)制，圖中物質(zhì)A是引物，B酶是耐高溫的Taq酶．
（3）將目的基因?qū)�入植物細胞有多種方法，最常用的是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
（4）若需要對轉(zhuǎn)入抗草甘麟基因的玉米進行個體生物學(xué)水平的鑒定，需要對玉米做噴灑草甘膦操作，以檢驗是否抗草甘膦．
（5）若實驗結(jié)果不理想，為了提高抗草甘麟酶活性，可以通過蛋白質(zhì)工程設(shè)計和改造編碼抗草甘麟酶的基因．
故選：．
（1）cDNA      啟動子
（2）DNA雙鏈復(fù)制      引物      Taq （或“耐高溫的DNA聚合”）
（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
（4）噴灑草甘膦
（5）蛋白質(zhì)

點評 本題考查PCR技術(shù)的相關(guān)知識，對于此類試題，學(xué)生需對相關(guān)知識進行歸納總結(jié)，構(gòu)建一定的知識網(wǎng)絡(luò)，本題意在考查考生的識記能力和理解能力．