Question

3．轉(zhuǎn)基因草莓中有能表達乙肝病毒表面抗原的基因，由此可獲得用來預防乙肝的一種新型疫苗，其培育過程如圖所示（①至④代表過程，A至C代表結(jié)構(gòu)或細胞）：

（1）圖中①過程用到的酶是DNA連接酶，這種酶主要有兩類，一類是從T₄噬菌體中分離得到的，另一類是從大腸桿菌中分離得到的，稱為E．coliDNA連接酶．形成B的過程叫做構(gòu)建基因表達載體（重組質(zhì)粒），這是基因工程的核心，除含目的基因外，還必須含有啟動子、終止子、標記基因等．
（2）②過程常用CaCl₂溶液（或Ca²⁺）處理農(nóng)桿菌，使之成為感受態(tài)細胞，利于完成轉(zhuǎn)化過程．
（3）圖中③過程叫做脫分化（去分化），④過程叫做再分化，將葉盤培養(yǎng)成草莓幼苗的技術(shù)是組織培養(yǎng)．
（4）在分子水平上，可采用抗原-抗體雜交的方法來檢測轉(zhuǎn)基因草莓果實提取液中有無相應的抗原．

Answer 1

分析 分析題圖：①表示基因表達載體的構(gòu)建過程；②將目的基因?qū)�入受體細胞（農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法）；③④表示植物組織培養(yǎng)過程，其中③是脫分化過程、④是再分化過程．圖中A是目的基因、B是基因表達載體（由啟動子、終止子、目的基因和標記基因等部分構(gòu)成）、C是愈傷組織．

解答 解：（1）①表示基因表達載體的構(gòu)建過程，需用DNA連接酶將目的基因和運載體（質(zhì)粒）連接形成重組質(zhì)粒．DNA連接酶包括T₄DNA連接酶和E．coliDNA連接酶．B是基因表達載體，形成B的過程叫做構(gòu)建基因表達載體．基因表達載體的組成包括啟動子、終止子、目的基因和標記基因等部分．
（2）將目的基因?qū)�入微生物細胞時，常用CaCl₂（Ca²⁺）處理微生物細胞（農(nóng)桿菌），使之成為易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)細胞，利于重組質(zhì)粒進入微生物細胞（農(nóng)桿菌）．
（3）有以上分析可知：圖中③是脫分化（去分化）過程，④是再分化過程，將葉盤培養(yǎng)成草莓幼苗需采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其原理是植物細胞具有全能性．
（4）在分子水平上的檢測方法有DNA分子雜交技術(shù)、分子雜交技術(shù)和抗原-抗體雜交法．要檢測轉(zhuǎn)基因草莓果實提取液中有無相應的抗原，可采用抗原-抗體雜交法．
故答案為：
（1）DNA連接酶       E．coliDNA連接酶　   構(gòu)建基因表達載體（重組質(zhì)粒）       啟動子、終止子、標記基因
（2）CaCl₂溶液（或Ca²⁺）　   感受態(tài)
（3）脫分化（去分化）　再分化　組織培養(yǎng)
（4）抗原-抗體雜交

點評 本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因草莓培養(yǎng)流程圖，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)；識記植物組織培養(yǎng)的具體過程，能正確分析題圖，結(jié)合圖中信息準確答題．