Question

20．黃曲霉毒素B1 （AFB1）存在于被黃曲霉菌污染的飼料中，它可以通過食物鏈進入動物體內并蓄積，引起瘤變．某些微生物能合成AFB1解毒酶．將該酶添加在飼料中可以降解AFB1，清除其毒性．下圖為采用基因工程技術生產AFB1解毒酶的流程圖

請回答：
（1）基因工程常見的運載工具（體）有質粒、λ噬菌體衍生物、動植物病毒．將目的基因導入酵母細胞，最常用的化學方法是CaCl₂處理．
（2）酵母細胞導入AFB1解毒酶基因后，采用DNA分子雜交技術，檢測到AFB1解毒酶基因存在酵母細胞內．實驗發(fā)現酵母菌中沒有檢測到合成的AFB1解毒酶，分析原因可能是酵母細胞中AFB1解毒酶基因沒有表達（或沒有轉錄和翻譯）．
（3）采用蛋白質工程進一步改造該酶的基本途徑是：從提高酶的活性出發(fā)，設計預期的蛋白質結構，推測應有的氨基酸序列，找到相對應的脫氧核苷酸序列．
（4）生態(tài)工程需遵循其基本原理，系統整體性原理強調各組分之間要有適當的比例，只有這樣地才能順利完成能量、物質、信息等的轉換和流通，并且實現總體功能大于部分之和的效果（或“1+1＞2”）．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示表示采用基因工程技術生產AFB₁解毒酶的流程，Ⅰ表示提取總RNA的過程，并以此為模板逆轉錄為cDNA；Ⅱ表示采用PCR技術體外擴增目的基因的過程．

解答 解：（1）基因工程的運載工具（體）有質粒，動植物病毒，λ噬菌體的衍生物．將目的基因導入微生物細胞時常有感受態(tài)轉化法，即用CaCl₂處理微生物細胞，使之處于易于吸收周圍環(huán)境中的感受態(tài)．
（2）檢測目的基因是否導入受體細胞后，常用DNA分子雜交技術；實驗發(fā)現酵母菌中沒有檢測到合成的AFB1解毒酶，其原因可能是酵母細胞中AFB1解毒酶基因沒有表達（或沒有轉錄和翻譯）．
（3）采用蛋白質工程進一步改造該酶的基本途徑是：從提高酶的活性出發(fā)，設計預期的蛋白質結構，推測應有的氨基酸序列，找到相對應的脫氧核苷酸序列．
（4）生態(tài)工程需遵循其基本原理，系統整體性原理強調各組分之間要有適當的比例，只有這樣地才能順利完成能量、物質、信息等的轉換和流通，并且實現總體功能大于部分之和的效果（或“1+1＞2”）．
故答案為：
（1）質粒、λ噬菌體衍生物、動植物病毒       CaCl₂處理
（2）DNA分子雜交技術     酵母細胞中AFB1解毒酶基因沒有表達（或沒有轉錄和翻譯）
（3）脫氧核苷酸序列
（4）適當的比例      總體功能大于部分之和的效果（或“1+1＞2”）

點評 本題結合圖解，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)；識記蛋白質工程的基本途徑；識記生態(tài)工程的基本原理，能結合所學的知識準確答題，屬于考綱識記層次的考查．