Question

【題目】登革熱病毒可以感染人類并導(dǎo)致嚴(yán)重疾病，為獲得適用于臨床檢測的病毒抗原，研究者從登革熱病毒中獲取其外膜抗原基因，讓它在大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)，具體過程如圖． 請回答下列問題：

（1）登革熱病毒需培養(yǎng)在動物細(xì)胞中，原因是 ． 細(xì)胞培養(yǎng)液中常常需要添加 ， 以防培養(yǎng)過程中受污染．
（2）①過程包括和擴增，分別需要的酶是和 ．
（3）②過程需要的工具酶是 ．
（4）獲得的病毒蛋白可用于檢測患者血清中的（抗原/抗體），以確診疾�。�

Answer 1

【答案】
（1）病毒無法獨立生活，必須寄生在活細(xì)胞中；抗生素
（2）逆轉(zhuǎn)錄（反轉(zhuǎn)錄）；PCR（目的基因）；逆轉(zhuǎn)錄酶；Taq酶
（3）限制酶和DNA連接酶
（4）抗體
【解析】解：（1）病毒無法獨立生活，必須寄生在活細(xì)胞中，因此登革熱病毒需培養(yǎng)在動物細(xì)胞．動物細(xì)胞培養(yǎng)時，為了防止雜菌污染，需要在培養(yǎng)液中加入抗生素．（2）登革熱病毒的遺傳物質(zhì)是RNA，因此①過程包括逆轉(zhuǎn)錄（反轉(zhuǎn)錄）和PCR（目的基因）擴增，逆轉(zhuǎn)錄需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化，PCR技術(shù)在較高溫度下進(jìn)行，需要耐高溫DNA聚合酶（Taq酶）．（3）②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，該過程首先需要用限制酶切割含有目的基因的DNA和運載體，其次需要用DNA連接酶將目的基因與運載體連接形成重組DNA．（4）根據(jù)抗原﹣抗體特異性結(jié)合的原理，獲得的病毒蛋白可作為抗原，用于檢測患者血清中的抗體，以確診疾病． 所以答案是：（1）病毒無法獨立生活，必須寄生在活細(xì)胞中；抗生素；（2）逆轉(zhuǎn)錄（反轉(zhuǎn)錄）；PCR（目的基因）；逆轉(zhuǎn)錄酶；Taq酶；（3）限制酶和DNA連接酶；（4）抗體
【考點精析】本題主要考查了基因工程的原理及技術(shù)的相關(guān)知識點，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù)才能正確解答此題．