Question

血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細胞的主要組成成分，負責(zé)血液中O₂和部分CO₂的運輸．請根據(jù)血紅蛋白的提取和分離流程圖（如圖1））回答問題．

（1）將實驗流程圖補充完整：A為

 

，B為

 

．
（2）血紅蛋白的提取方法可以采用

 

，洗滌紅細胞的目的是去除

 

，洗滌干凈的標志是

 

．
（3）已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質(zhì)分子，其分子大小、所帶電荷的性質(zhì)和數(shù)量情況如圖2所示．．
①將樣品裝入透析袋中透析12h，若分子乙保留在袋內(nèi)，則分子

 

也保留在袋內(nèi)．
②若用凝膠色譜柱分離樣品中的蛋白質(zhì)，則分子

 

移動速度最快．
③若將樣品以2000r/min的速度離心10min，分子戊存在于沉淀中，則分子

 

可能不存在于沉淀中．

Answer 1

考點：蛋白質(zhì)的提取和分離

專題：

分析：1、血紅蛋白的提取和分離一般可分為四步：樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定．樣品處理包括四個步驟，即紅細胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液和透析．樣品純化的目的是通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)除去．
2、透析袋是利用半透膜制作的，半透膜可以讓小分子可以自由進出，而大分子不能通過．
3、凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量大小分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道，路程長，移動的速度慢，相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)不容易進入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動的速度快．

解答： 解：（1）樣品處理包括四個步驟，即紅細胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液和透析．故A為血紅蛋白的釋放，B為裝填完凝膠色譜柱的操作，故B為樣品的加入和洗脫．
（2）血紅蛋白的提取方法可以采用凝膠色譜法，洗滌紅細胞的目的是去除雜蛋白，洗滌干凈的標志是上清液不再呈現(xiàn)黃色．
（3）據(jù)圖2可知，分子量大小為丙＞丁＞乙＞戊＞甲．
①血紅蛋白溶液的粗分離采用的方法是透析，即將集的血紅蛋白溶液放在透析袋中進行透析，去掉分子量較小的雜質(zhì)，原理是小分子雜質(zhì)可以通過透析袋進入緩沖液中，血紅蛋白分子量較大，不能通過透析袋進入緩沖溶液．將樣品裝入透析袋中透析12h，若分子乙保留在袋內(nèi)，則分子丙和丁也保留在袋內(nèi)，因其分子量大于乙．
②若用凝膠色譜柱分離樣品中的蛋白質(zhì)，分子量大的分子經(jīng)過的路程短，故分子量大的蛋白質(zhì)分子先洗脫出來，則分子丙移動速度最快．
③若將樣品以2000r/min的速度離心10min，分子量大的分子進入沉淀中，故若分子戊存在于沉淀中，則分子乙、丙、丁均存在于沉淀中，分子較小的甲可能不存在于沉淀中．
故答案為：
（1）血紅蛋白的釋放     樣品的加入和洗脫
（2）凝膠色譜法       雜蛋白    上清液不再呈現(xiàn)黃色
（3）①丙和丁    ②丙     ③甲

點評：本題考查學(xué)生對蛋白質(zhì)的提取和分離實驗操作步驟的識記和理解．難度一般，對血紅蛋白的提取和分離的實驗的實驗原理和具體操作方法的掌握是解答本題的關(guān)鍵．