Question

14．某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)．實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計(jì)數(shù)．請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問(wèn)題．
（1）培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了氮源和碳源．
（2）為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣本的平板置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37℃．要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種無(wú)菌水作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)．
（3）培養(yǎng)20小時(shí)后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說(shuō)明湖水樣品中有多種細(xì)菌．一般說(shuō)來(lái)，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細(xì)菌污染的程度越高（填“高”或“低”）．
（4）如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，請(qǐng)分析接種的具體方法．

獲得圖A效果的接種方法是稀釋涂布平板法，獲得圖B效果的接種方法是平板劃線法．某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過(guò)高（或培養(yǎng)過(guò)程被雜菌污染），應(yīng)當(dāng)怎樣操作？增大稀釋倍數(shù)（或嚴(yán)格無(wú)菌操作，原因與操作要對(duì)應(yīng)）．
（5）如果在培養(yǎng)基中加入青霉素，可以用于篩選耐青霉素的真菌，這種培養(yǎng)基（按功能分）被稱為選擇培養(yǎng)基．

Answer 1

分析 1、微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營(yíng)養(yǎng)要素成分時(shí)并不是起單一方面的作用．
2、微生物常見的接種的方法：
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．

解答 解：（1）蛋白胨來(lái)源于動(dòng)物原料，含有維生素、糖和有機(jī)氮等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，在培養(yǎng)基中主要作為氮源；淀粉是糖類，在培養(yǎng)基中主要作為碳源．
（2）要想使微生物快速的繁殖，就要置于適宜的條件，特別是溫度，所以要置于恒溫培養(yǎng)箱中；為了使結(jié)果更可靠，應(yīng)進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)，即同時(shí)取一個(gè)空白培養(yǎng)基接種無(wú)菌水作為對(duì)照放置于相同條件下培養(yǎng)．
（3）不同細(xì)菌形成的菌落形態(tài)、顏色等特征不同，因此如果觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說(shuō)明湖水樣品中有多種細(xì)菌．一般說(shuō)來(lái)，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細(xì)菌污染的程度越高．
（4）圖A中菌落均勻分布，接種方法是稀釋涂布平板法，圖B的接種方法是平板劃線法．某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過(guò)高（或培養(yǎng)過(guò)程被雜菌污染），應(yīng)當(dāng)增大稀釋倍數(shù)（或嚴(yán)格無(wú)菌操作）．
（5）如果在培養(yǎng)基中加入青霉素，可以用于篩選耐青霉素的真菌，這種培養(yǎng)基（按功能分）被稱為選擇培養(yǎng)基．
故答案為：
（1）氮源　碳源
（2）恒溫培養(yǎng)箱　無(wú)菌水　
（3）菌落　高
（4）稀釋涂布平板法　平板劃線法　菌液濃度過(guò)高（或培養(yǎng)過(guò)程被雜菌污染）　增大稀釋倍數(shù)（或嚴(yán)格無(wú)菌操作，原因與操作要對(duì)應(yīng)）
（5）青霉素　選擇培養(yǎng)基

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)、培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用等知識(shí)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的成分、無(wú)菌技術(shù)中的滅菌方法和微生物培養(yǎng)的條件，掌握培養(yǎng)基的種類及功能和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的原則，再規(guī)范答題，屬于考綱識(shí)記層次的考查．