Question

小鼠雜交瘤細胞表達的單克隆抗體用于人體試驗時易引起過敏反應(yīng)，為了克服這個缺陷，可選擇性擴增抗體的可變區(qū)基因（目的基因）后再重組表達．下列相關(guān)敘述正確的個數(shù)有（　�。�
①設(shè)計擴增目的基因的引物時不必考慮表達載體的序列；
②用PCR方法擴增目的基因時不必知道基因的全部序列；
③PCR體系中一定要添加從受體細胞中提取的DNA聚合酶；
④一定要根據(jù)目的基因編碼產(chǎn)物的特性選擇合適的受體細胞．

• A、一個
• B、兩個
• C、三個
• D、四個

Answer 1

考點：PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用

專題：

分析：PCR技術(shù)的相關(guān)知識：
1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應(yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)．
2、原理：DNA復(fù)制．
3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物．
4、過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開．

解答： 解：①設(shè)計擴增目的基因的引物時要考慮表達載體相關(guān)序列，從而保證目的基因能與表達載體相連接及正常表達，①錯誤；  
②只要設(shè)計出目的基因的引物，接下來即可自動進行，而不必知道其全部序列，②正確；
③PCR技術(shù)需要特殊的耐高溫的DNA聚合酶，從細胞內(nèi)提取的DNA聚合酶不耐高溫，③錯誤；  
④根據(jù)目的基因的編碼產(chǎn)物要選擇特定合適的受體細胞，從而保證目的基因能表達出所序產(chǎn)物，④正確．
故選：B．

點評：本題主要考查基因工程中PCR技術(shù)等相關(guān)知識，意在考查了考生識記和理解所學(xué)知識的要點，試題難度中等．