Question

【題目】沒吃完的西瓜會蓋上保鮮膜放入冰箱儲藏。研究表明，有時(shí)候蓋上保鮮膜儲藏的西瓜中的細(xì)菌種類和數(shù)目反而比沒用保鮮膜的多。某生物研究小組用保鮮膜保存三天的西瓜表面的瓜瓤制備浸出液，研究細(xì)菌的種類和數(shù)量。

（1）配制的培養(yǎng)基一般都含有水、無機(jī)鹽、____________。常采用____________法對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，滅菌前需將pH調(diào)至________________________。

（2）為了避免培養(yǎng)基污染，在培養(yǎng)過程中，需將平板____________（填正置或倒置）。為了觀察浸出液中微生物的種類和數(shù)量，采用____________法接種。接種時(shí)，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行的原因是__________________。

（3）將1m L西瓜浸出液稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0．1m L稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為26、28和27。據(jù)此可得出每升西瓜浸出液中的活菌數(shù)為____________，這種方法的統(tǒng)計(jì)結(jié)果比活菌的實(shí)際數(shù)目____________________________________。

Answer 1

【答案】碳源和氮源 高壓蒸汽滅菌 中性或微堿性 倒置 稀釋涂布平板 避免環(huán)境中微生物的污染 2.7×107 低

【解析】

（1）培養(yǎng)基的成分主要包括水、無機(jī)鹽、碳源、氮源，培養(yǎng)微生物時(shí)還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求；

（2）微生物常見的接種的方法：①平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體，這就是菌落。②稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。分為系列稀釋操作和涂布平板操作兩步。

（1）培養(yǎng)基的成分一般包括水、碳源、氮源和無機(jī)鹽,常采用高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，滅菌前需將pH調(diào)至中性或微堿性。

（2）培養(yǎng)過程中，為了避免培養(yǎng)基被冷凝水污染，需要將平板倒置。將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落，因此為了確定浸出液中細(xì)菌的種類和數(shù)量，一般采用稀釋涂布法接種。為了避免環(huán)境中微生物的污染，接種時(shí)應(yīng)該在酒精燈火焰附近進(jìn)行。

（3）3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為26、28和27，平均值為27，每升西瓜浸出液中的活菌數(shù)=27×10×100×1000=2.7×107，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，所以統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低。