Question

請(qǐng)回答下列有關(guān)基因工程的問(wèn)題：
（1）如果用某種生物發(fā)育的某個(gè)時(shí)期的mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的

 

片段，與載體連接后儲(chǔ)存在一個(gè)受體菌群中，這個(gè)受體菌群體就叫做這種生物的

 

．
（2）一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了目的基因外，還必須有

 

，

 

以及

 

．
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程，稱(chēng)為

 

．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞采用最多的方法是

 

法．轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中采用最多，也是最為有效的一種將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞的方法是

 

．大腸桿菌最常用的轉(zhuǎn)化方法是：首先用

 

處理細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種

 

的生理狀態(tài)，這種狀態(tài)的細(xì)胞被稱(chēng)作感受態(tài)細(xì)胞．然后將重組表達(dá)載體DNA溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度條件下促進(jìn)

 

，完成轉(zhuǎn)化過(guò)程．
（4）目的基因?qū)�入受體細(xì)胞后，是否可以穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性，只有通過(guò)檢測(cè)與鑒定才能知道．首先，要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物

 

上是否插入了目的基因．其次，還需要檢測(cè)目的基因是否

 

．最后檢測(cè)目的基因是否

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專(zhuān)題：

分析：1、基因文庫(kù)是指將含有某種生物不同基因的許多DNA片段，導(dǎo)入到受體菌的群體中儲(chǔ)存，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同基因．
2、基因表達(dá)載體的組成包括：目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因．
3、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
4、目的基因的檢測(cè)與鑒定：（1）分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．（2）個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答： 解：（1）如果用某種生物發(fā)育的某個(gè)時(shí)期的mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種互補(bǔ)DNA片段，與載體連接后儲(chǔ)存在一個(gè)受體菌群中，這個(gè)受體菌群體就叫做這種生物的cDNA（部分基因）文庫(kù)．
（2）一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了目的基因外，還必須有啟動(dòng)子、終止子以及標(biāo)記基因．
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程，稱(chēng)為轉(zhuǎn)化．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中采用最多，也是最為有效的一種將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞的方法是顯微注射技術(shù)．大腸桿菌最常用的轉(zhuǎn)化方法是：首先用Ca²⁺處理細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種能吸收環(huán)境中DNA的生理狀態(tài)，這種狀態(tài)的細(xì)胞被稱(chēng)作感受態(tài)細(xì)胞．然后將重組表達(dá)載體DNA溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度條件下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA，完成轉(zhuǎn)化過(guò)程．
（4）目的基因?qū)�入受體細(xì)胞后，是否可以穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性，只有通過(guò)檢測(cè)與鑒定才能知道．首先，要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因．其次，還需要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA．最后檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)．
故答案為：
（1）多種互補(bǔ)DNA       cDNA（部分基因）文庫(kù)
（2）啟動(dòng)子         終止子       標(biāo)記基因
（3）轉(zhuǎn)化      農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化      顯微注射技術(shù)       Ca²⁺       能吸收環(huán)境中DNA       感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA
（4）染色體的DNA      轉(zhuǎn)錄出了mRNA       翻譯成蛋白質(zhì)

點(diǎn)評(píng)：本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷能力．基因工程是考查的重點(diǎn)知識(shí)，與細(xì)胞工程、胚胎工程等現(xiàn)代生物技術(shù)都有一定聯(lián)系．復(fù)習(xí)時(shí)可以建立知識(shí)框架，幫助記憶和理解．