11．下面是對(duì)大腸桿菌進(jìn)行數(shù)量測(cè)定的實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題．步驟如下：
A．制備稀釋倍數(shù)為102、103、104、105、106的系列稀釋液．
B．如圖是采用純化酵母菌培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖．
（1）對(duì)大腸桿菌進(jìn)行數(shù)量測(cè)定選用圖[A]稀釋涂布平板法接種樣品．
結(jié)果分析：
C．適宜溫度下培養(yǎng)．
（2）測(cè)定的大腸桿菌數(shù)，在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果，正確可信的是D
A．一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是53
B．兩個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是12和78，取平均值45
C．三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是5、85和60，取平均值50
D．四個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是44、31、64和55，取平均值48.5
（3）一同學(xué)在稀釋倍數(shù)為105的培養(yǎng)基中測(cè)得平板上菌落數(shù)的平均值為43.4，那么每毫升樣品中的菌落數(shù)是（涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.1mL）4.34×107個(gè)．
（4）用這種方法測(cè)定密度，實(shí)際活菌數(shù)量要比測(cè)得的數(shù)量少，因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)平板上觀察的是一個(gè)菌落．
（5）某同學(xué)在測(cè)定大腸桿菌的密度時(shí)發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)基上還有其他雜菌的菌落，能否肯定該大腸桿菌的品系被污染了？不能，為什么？因?yàn)椴荒芘懦s菌來(lái)自培養(yǎng)基或來(lái)自培養(yǎng)過(guò)程．
（6）自己在家中制作的果醋很容易受大腸桿菌等微生物的污染，而包裝瓶上寫(xiě)著105℃高溫瞬時(shí)的果醋瓶上寫(xiě)著“不含任何防腐劑，最長(zhǎng)保質(zhì)期為一年”，其中的奧秘是高溫殺死了微生物．

分析 1、平板劃線法是接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的造作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面，在數(shù)次劃線之后培養(yǎng)，可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的子細(xì)胞群體-菌落；稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋，然后將不同梯度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基上，進(jìn)行培養(yǎng)獲得由單細(xì)胞繁殖而來(lái)的菌落．
2、對(duì)微生物進(jìn)行分離、計(jì)數(shù)常用的接種方法是稀釋涂布平板法，估算每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)時(shí)，往往選取30～300的平板，取至少三個(gè)平板的平均值，每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)=（平板的平均菌落數(shù)÷涂布的體積）×稀釋的倍數(shù)；由于當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)平板上觀察的是一個(gè)菌落，因此估算的菌落數(shù)少于實(shí)際菌落數(shù)．
3、微生物培養(yǎng)過(guò)程中要嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作．

解答 解：（1）對(duì)大腸桿菌進(jìn)行數(shù)量測(cè)定的實(shí)驗(yàn)常用的接種方法是稀釋涂布平板法，即圖中的A．
（2）分析選項(xiàng)可知，D選項(xiàng)中四個(gè)平板的每個(gè)平板的菌落數(shù)在30～300之間，且非常接近，因此D選項(xiàng)的結(jié)果最可靠．
（3）每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)是═（平板的平均菌落數(shù)÷涂布的體積）×稀釋的倍數(shù)=（43.4÷0.1）×105=34.34×107個(gè)．
（4）由于當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)平板上觀察的是一個(gè)菌落，因此估算的菌落數(shù)少于實(shí)際菌落數(shù)．
（5）某同學(xué)在測(cè)定大腸桿菌的密度時(shí)發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)基上還有其他雜菌的菌落，不能確定大腸桿菌品系被污染，也可能是培養(yǎng)基被污染或接種過(guò)程沒(méi)有嚴(yán)格按照無(wú)菌技術(shù)進(jìn)行操作或培養(yǎng)過(guò)程污染．
（6）105℃高溫將微生物殺死，因此可以較長(zhǎng)時(shí)間保存．
故答案為：
（1）A  稀釋涂布平板法
（2）D
（3）4.34×107
（4）少   當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)平板上觀察的是一個(gè)菌落
（5）不能   因?yàn)椴荒芘懦s菌來(lái)自培養(yǎng)基或來(lái)自培養(yǎng)過(guò)程
（6）高溫殺死了微生物

點(diǎn)評(píng) 本題旨在考查學(xué)生對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)技術(shù)的熟練掌握并應(yīng)用相關(guān)知識(shí)解決實(shí)際問(wèn)題的能力．

練習(xí)冊(cè)系列答案
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科目：高中生物 來(lái)源：2015-2016學(xué)年江西省上饒市高一上期末生物試卷（解析版） 題型：選擇題

（2013秋•福州校級(jí)期末）仙人掌生活在缺水的沙漠中，在仙人掌細(xì)胞中含量最多的化合物是（ ）

A．水 B．蛋白質(zhì) C．脂肪 D．糖類

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：選擇題

2．下列關(guān)于泡菜中亞硝酸鹽含量測(cè)定的操作順序正確的是（　�。�
①配制溶液�、谥苽錁悠诽幚硪骸、壑苽錁�(biāo)準(zhǔn)顯色液  ④比色．
A．①②③④B．②③④①C．①③②④D．③①②④

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：解答題

19．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）胡蘿卜素是一種常用食用色素，可分別從胡蘿卜或產(chǎn)胡蘿卜的微生物菌體中提取獲得．流程如下：

篩選產(chǎn)胡蘿卜素的酵母菌菌R時(shí)，可選用稀釋涂布平板法或平板劃線法接種．采用平板劃線法接種時(shí)需先灼燒接種環(huán)，其目的是滅菌（防止雜菌污染）．培養(yǎng)酵母菌R時(shí)，培養(yǎng)基中的蔗糖和硝酸鹽可分別為酵母菌R的生長(zhǎng)提供碳源和氮源．
（2）現(xiàn)代人吃什么都講究天然，所以目前市場(chǎng)上果汁飲料、果酒、果醋越來(lái)越受到人們的青睞，
在果汁加工過(guò)程中可添加纖維素酶和果膠酶來(lái)提高出汁率和澄清度．蘋(píng)果醋是最受歡迎的飲料之一，其生產(chǎn)過(guò)程中利用了醋酸菌菌的發(fā)酵作用，該過(guò)程需將溫度控制在30～35℃．
（3）我國(guó)植物學(xué)家將名貴蘭花的莖尖細(xì)胞放進(jìn)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，最終發(fā)育成完整的新植株．在培養(yǎng)過(guò)程中，除了提供水分、無(wú)機(jī)鹽、糖類、維生素以及氨基酸外，還需要在培養(yǎng)基中加入植物激素．培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素用量的比值高（高/低）時(shí)，有利于根的分化．在培養(yǎng)過(guò)程中，除必要的溫度、光照和氧氣等外界條件外，成功的另一個(gè)關(guān)鍵是操作過(guò)程必須保證無(wú)菌．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：選擇題

6．下列有關(guān)生物技術(shù)應(yīng)用的敘述中，正確的是（　　）
A．培養(yǎng)自養(yǎng)微生物時(shí)，需要培養(yǎng)基提供碳源
B．探究加酶洗衣粉的最適溫度時(shí)，洗衣粉量是自變量
C．稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比實(shí)際數(shù)目低
D．制作泡菜密封壇口是為了促進(jìn)酵母菌增殖

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：解答題

16．下面是對(duì)大腸桿菌進(jìn)行數(shù)量測(cè)定的實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題．
（1）制備稀釋倍數(shù)為102、103、104、105、106的系列稀釋液．
（2）為了得到更加準(zhǔn)確的結(jié)果，選用適宜的方法接種樣品：右圖是利用平板劃線法 法進(jìn)行微生物接種，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，為達(dá)到這一目的，操作上應(yīng)注意第二次及以后的每次劃線前要灼燒接種環(huán)，冷卻后從上一區(qū)劃線末端開(kāi)始化，首尾區(qū)的劃線不能相接．
（3）適宜溫度下培養(yǎng)．結(jié)果分析：
①一同學(xué)在稀釋倍數(shù)為105的培養(yǎng)基中測(cè)得平板上菌落數(shù)的平均值為32.4個(gè)，那么每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)是（接種時(shí)所用稀釋液的體積為0.1mL）3.24×107 個(gè)．
②用這種方法測(cè)得的數(shù)量比實(shí)際活菌數(shù)量要少，因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)平板上觀察的是一個(gè)菌落．
（4）在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒；已滅菌的材料用具應(yīng)避免與周圍物品接觸．
（5）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染．對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是將未接種微生物的培養(yǎng)基在適宜的條件下放置一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：解答題

3．大腸桿菌是人和許多動(dòng)物腸道中的主要細(xì)菌，若水中大腸桿菌超標(biāo)，說(shuō)明水源可能被糞便污染．伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基可用于檢測(cè)水中大腸桿菌的數(shù)量．回答下列問(wèn)題：
（1）伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基含有大腸桿菌生長(zhǎng)繁殖必須的碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽四類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，大腸桿菌的代謝產(chǎn)物會(huì)和伊紅、美藍(lán)發(fā)生反應(yīng)，使菌落呈現(xiàn)黑色．伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基屬于鑒別（填“選擇”或“鑒別”）培養(yǎng)基．
（2）某水樣的大腸桿菌嚴(yán)重超標(biāo)，需采用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)．當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌．一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，這樣統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)小于（填“大于”、“等于”或“小于”）活菌的實(shí)際數(shù)目．
（3）用大劑量紫外線照射大腸桿菌，獲得了變異菌株，這種變異來(lái)源于基因突變．利用平板劃線法對(duì)該變異菌株進(jìn)行純化，在第二次以及其后的劃線操作時(shí)，菌體來(lái)自上一次劃線的末端．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：解答題

20．胡蘿卜素是一種常用的食用色素，在保護(hù)視力方面具有重要功效．從胡蘿卜或產(chǎn)胡蘿卜素的微生物菌體中提取胡蘿卜素的流程圖如圖1，請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）篩選產(chǎn)胡蘿卜素的酵母菌R時(shí)，所用培養(yǎng)基從用途上看屬于選擇培養(yǎng)基．在培養(yǎng)酵母菌R時(shí)，培養(yǎng)基中的蔗糖和硝酸鹽可提供碳源和氮源等營(yíng)養(yǎng)．為了使發(fā)酵菌種迅速繁殖，應(yīng)用液體培養(yǎng)基．發(fā)酵過(guò)程中應(yīng)采用無(wú)菌技術(shù)來(lái)防止外來(lái)雜菌的入侵，保證發(fā)酵正常進(jìn)行．
（2）如圖2甲為提取胡蘿卜素的裝置示意圖，請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題：在胡蘿卜素的提取過(guò)程中：石油醚是理想的萃取劑，因?yàn)樗哂校悍悬c(diǎn)高、充分溶解胡蘿卜素、不與水混溶等優(yōu)點(diǎn)．
（3）從胡蘿卜中提取胡蘿卜素，干燥時(shí)應(yīng)控制好時(shí)間和溫度，以防止胡蘿卜素分解；萃取時(shí)一般不直接用酒精燈加熱而用水浴加熱，因?yàn)檩腿┮兹家妆谳腿∫簼饪s前需要進(jìn)行過(guò)濾．
（4）圖乙是胡蘿卜素鑒定結(jié)果示意圖．請(qǐng)據(jù)圖回答：實(shí)驗(yàn)組是B、C，對(duì)照組是A、D．實(shí)驗(yàn)得出的結(jié)論是萃取樣品中含有β-胡蘿卜素，用紙層析法鑒定提取的胡蘿卜素時(shí)需用胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)樣品作為對(duì)照．B、C上面兩個(gè)色素點(diǎn)表示的含義是萃取樣品中還含有其他色素．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：選擇題

1．某生物的基因型為AaBB，若要用它培養(yǎng)得到以下基因型的生物：①AABB；②aB；③AaBBC；④AAaaBBBB，所用到的技術(shù)分別是（　　）
A．誘變育種、基因工程、花藥離體培養(yǎng)、植物組織培養(yǎng)
B．雜交育種、花藥離體培養(yǎng)、基因工程、多倍體育種
C．誘變育種、花藥離體培養(yǎng)、多倍體育種、基因工程
D．基因工程、植物組織培養(yǎng)、嫁接、多倍體育種

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同步練習(xí)冊(cè)答案