Question

【題目】高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性．研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如圖所示．請回答下列問題：

（1）進(jìn)行①過程的目的是_______________，②過程所使用的接種方法是________________。

（2）Ⅰ、Ⅱ號培養(yǎng)基配制和滅菌時(shí)，滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是_______________，對培養(yǎng)基常用__________________進(jìn)行滅菌。對于空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性還能_____________。如果要檢測滅菌是否徹底，可以采用的方法是： ______________。

（3）部分嗜熱菌的菌落周圍形成透明圈，應(yīng)挑出透明圈________（填“大”或“小”）的菌落接種到Ⅱ號培養(yǎng)基。

（4）根據(jù)培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落數(shù)目和稀釋倍數(shù)計(jì)算得出細(xì)菌數(shù)目往往比實(shí)際的數(shù)目低，原因是_____________________________________。

Answer 1

【答案】稀釋（嗜熱菌培養(yǎng)液）稀釋涂布平板法先調(diào)pH，后滅菌高壓蒸汽滅菌法損傷DNA的結(jié)構(gòu)將滅過菌的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成大當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落

【解析】

閱讀題干和題圖可知，本題是利用微生物培養(yǎng)的知識分離高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，先分析題圖了解分離高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌的過程，然后根據(jù)問題的具體內(nèi)容梳理相關(guān)知識點(diǎn)分析解答。

（1）分析題圖可知，①過程是梯度稀釋，目的是對樣品進(jìn)行稀釋；②過程是利用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種。

（2）微生物培養(yǎng)基配制和滅菌時(shí)，應(yīng)先調(diào)節(jié)pH值，然后再進(jìn)行滅菌，如果先滅菌再調(diào)節(jié)pH會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基被污染；一般對配制的培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌；紫外線能使蛋白質(zhì)變性還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)，因此對于空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅；如果要檢測滅菌是否徹底，可以將滅過菌的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成。

（3）能分解淀粉的嗜熱菌在Ⅰ號培養(yǎng)基上生長時(shí)可釋放淀粉酶，分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈，透明圈越大淀粉酶的活性越強(qiáng)，所以要從中挑出透明圈大的菌落，接種到Ⅱ號培養(yǎng)基上。

（4）當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，所以根據(jù)培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落數(shù)目和稀釋倍數(shù)計(jì)算得出細(xì)菌數(shù)目往往比實(shí)際的數(shù)目低。