【題目】回答下列有關基因表達和生物工程問題。

(1)基因工程是生物工程核心技術。下列是分子實驗室中構建產生胰島素基因工程菌的部分操作,正確流程是____________。(用題中編號排序)

①篩選含有胰島素基因的受體細胞 ②胰島素基因與運載體重組

③重組DNA導入受體細胞 ④獲取胰島素基因

下圖所示為用PvuⅠ限制酶切下的某目的基因(4kb,lkb=1000個堿基對長度)及其上DNA片段示意圖。

(2)片段D為目的基因中的某一片段,有關敘述正確的是_________(多選)。

A.若圖中的ACT能決定一個氨基酸,則ACT可稱為一個密碼子

B.DNA連接酶作用于②處,DNA解旋酶作用于①處

C.若只用片段D中的3個堿基對,則可以排列出43種片段

D.同一脫氧核苷酸鏈中相鄰的兩個堿基之間依次經(jīng)過“一脫氧核糖—磷酸基—脫氧核糖—”連接

下圖所示為三種質粒示意圖。圖中AP為氨芐青霉素抗性基因,Tc為四環(huán)素抗性基因。EcoRⅠ(0.7Kb)、PvuⅠ(0.8Kb)等為限制酶及其切割的位點與復制原點的距離。復制原點是在基因組上復制起始的一段序列,是指質粒在受體細胞中復制時的起點。

(3)圖中質粒A、質粒C能否作為目的基因運載體最理想的質粒?__________(能/否)。為什么,

請說明理由 __________________________________________________________________.

(4)用EcoRⅠ完全酶切目的基因和質粒B形成的重組質粒(EcoRⅠ在目的基因和質粒上的酶切位點如上兩圖所示),則進行電泳后觀察可出現(xiàn)長度為1.1kb和_____kb,或者分別是_____kb和______kb兩個片段。(重組質粒上目的基因的插入位點與EcoRⅠ的識別位點之間的堿基對忽略不計)。

【答案】 ④②③① BD 質粒A缺少標記基因;質粒C在用和目的基因相同的限制酶切割時,復制原點會被限制酶切割,會影響重組質粒的自主復制 5.6 3.1 3.6

【解析】【試題分析】

1.基因工程的基本操作程序是:目的基因的獲取→基因表達載體的構建→將目的基因導入受體細胞→目的基因的檢測與鑒定。

2. 本題主要是對基因表達載體的構建的相關知識進行綜合考查,有一定的難度。需要考生對所學知識進行歸納梳理、把握知識的內在聯(lián)系,再結合題意,一步一步認真作答,才能順利解題。

(1)根據(jù)基因工程的基本操作程序可推知,構建產生胰島素基因工程菌的流程是④獲取胰島素基因、②胰島素基因與運載體重組、③重組DNA導入受體細胞、①篩選含有胰島素基因的受體細胞。

(2)密碼子是由DNA轉錄形成的信使RNA分子上的三個連續(xù)堿基組成的,若圖中的ACT能決定一個氨基酸,則其對應的密碼子是UGA,A項錯誤;DNA連接酶作用于②磷酸二酯鍵處,DNA解旋酶作用于①氫鍵處,B項正確;若只用片段D中的3個堿基對(堿基對已經(jīng)確定,而且是三種不同的堿基對),則可以排列出3×2×1=6種片段,C項錯誤;結合圖示可知,同一脫氧核苷酸鏈中相鄰的兩個堿基之間依次經(jīng)過“一脫氧核糖—磷酸基—脫氧核糖—”連接,D項正確。

(3)據(jù)圖可知,質粒A缺少標記基因;質粒C在用和目的基因相同的限制酶切割時,復制原點會被限制酶切割,會影響重組質粒的自主復制。因此,圖中質粒A、質粒C不能作為目的基因運載體最理想的質粒。

(4)據(jù)圖可知,目的基因中除了有限制酶(PvuⅠ)的切點外,還存在一個限制酶EcoRⅠ的切割位點,可以把目的基因切割成1.0kb和3.0kb兩種長度的片段。用EcoRⅠ完全酶切目的基因和質粒B形成的重組質粒,則進行電泳后觀察可出現(xiàn)長度為0.1+1.0=1.1kb(質粒切割后形成的小的片段+切割目的基因時形成的小片段)和2.7-0.1+3.0=5.6kb(質粒切割后形成的大的片段+切割目的基因時形成的大片段);如果目的基因反過來插入,則進行電泳后觀察可出現(xiàn)長度為0.1+3.0=3.1kb(質粒切割后形成的小的片段+切割目的基因時形成的大片段)和2.7-0.1+1.0=3.6kb(質粒切割后形成的大的片段+切割目的基因時形成的小片段)。

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B.該細胞中有兩個染色體組,該動物的體細胞中最多含有四個染色體組

C.該細胞中無同源染色體,形成該細胞的母細胞中含有兩對同源染色體

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(2)寫出ANaOH的反應的化學方程式______________________________。

(3)反應的類型是_________,反應的類型是_____________。

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(1)取翅型純合品系的果蠅進行雜交實驗,結果如下表。

正交實驗中,親本的基因型是___________,F2中小翅個體的基因型是_____________;

(2)若已知果蠅控制眼色的基因可能會因為染色體片段的缺失而丟失(以X0表示,只有X0X0和X0Y的個體沒有眼色基因,無法存活),F(xiàn)有一紅眼雄果蠅()與一白眼雌果蠅()雜交,子代中出現(xiàn)了一只白眼雌果蠅。現(xiàn)欲利用一次雜交實驗來判斷這只果蠅的出現(xiàn)是染色體缺失造成的還是基因突變造成的,讓這只白眼雌果蠅與紅眼雄果蠅交配,如果子代中雌、雄果蠅數(shù)量比為________,則是基因突變造成的;如果子代中雌、雄果蠅數(shù)量比為________,則是染色體缺失造成的。

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①如果子代果蠅均為剛毛,則該雄果蠅基因型為

②如果子代_____________________________________________________________;

③如果子代_____________________________________________________________。

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