Question

6．埃博拉病毒（EBO）是一種能引起人類產(chǎn)生埃博拉出血熱的強致死性RNA病毒．EBO外殼蛋白具有較強的免疫原性，可用來制備疫苗，也可用于制備單克隆抗體．請回答下列問題：
（1）利用基因工程方法制備EBO外殼蛋白，以EBO外殼蛋白為抗原制備疫苗是預(yù)防埃博拉出血熱的一種有效措施．為了從牛分泌的乳汁中提取EBO外殼蛋白，在將EBO蛋白基因?qū)�入牛受體細胞前，基因的前端必須含有使其能在牛的乳腺細胞中特異性表達的（乳腺蛋白基因的）啟動子，它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點．這種通過分泌乳汁來生產(chǎn)所需要的藥品的轉(zhuǎn)基因動物稱為乳腺生物反應(yīng)器．
（2）利用EBO作為抗原處理小鼠，然后提取小鼠的B淋巴細胞（漿細胞或效應(yīng)B細胞）與骨髓瘤細胞進行融合，再用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選，獲得雜交瘤細胞，雜交瘤細胞還需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得具有特性的雜交瘤細胞，最后將雜交瘤細胞在體外或體內(nèi)大規(guī)模培養(yǎng)，從細胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中就可以提取出大量單克隆抗體，單克隆抗體最主要的優(yōu)點是特異性強，靈敏度高，并可能大量制備．

Answer 1

分析 1、動物乳腺生物反應(yīng)器是基于轉(zhuǎn)基因技術(shù)平臺，使外源基因?qū)�入動物基因組中并定位表達于動物乳腺，利用動物乳腺天然、高效合成并分泌蛋白的能力，在動物的乳汁中生產(chǎn)一些具有重要價值產(chǎn)品的轉(zhuǎn)基因動物的總稱．
乳腺生物反應(yīng)器是最理想的生物反應(yīng)器，它的優(yōu)點：（1）藥物蛋白只在乳腺內(nèi)，對動物的生理活動不影響．（2）長期收集也不會對動物造成傷害．（3）產(chǎn)品成本低．（4）無論純化還是使用都很方便．
2、單克隆抗體的制備過程中利用了動物細胞融合技術(shù)和動物細胞培養(yǎng)技術(shù)，在制備的過程中的兩次篩選考生必須識記，同時在進行雜交瘤細胞體外培養(yǎng)的過程需注意培養(yǎng)條件．

解答 解：（1）通過分泌乳汁來生產(chǎn)所需要的藥品的轉(zhuǎn)基因動物稱為乳腺生物反應(yīng)器，乳腺生物反應(yīng)器是最理想的生物反應(yīng)器．為了從牛分泌的乳汁中提取EBO外殼蛋白，在將EBO蛋白基因?qū)�入牛受體細胞前，基因的前端必須含有使其能在牛的乳腺細胞中特異性表達的（乳腺蛋白基因的）啟動子，啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點．
（2）在單克隆抗體的制備過程中，利用EBO作為抗原處理小鼠，然后提取小鼠的B淋巴細胞（漿細胞或效應(yīng)B細胞）與骨髓瘤細胞進行融合，再用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選，獲得雜交瘤細胞，雜交瘤細胞還需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得既能無限增殖，又能分泌特異性抗體的雜交瘤細胞，最后將雜交瘤細胞在體外或體內(nèi)大規(guī)模培養(yǎng)，從細胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中就可以提取出大量單克隆抗體，單克隆抗體最主要的優(yōu)點是特異性強，靈敏度高，并可能大量制備．
故答案為：
（1）（乳腺蛋白基因的）啟動子   RNA聚合酶     乳腺生物反應(yīng)器
（2）B淋巴細胞（漿細胞或效應(yīng)B細胞）    選擇培養(yǎng)基     克隆化培養(yǎng)    抗體檢測
既能無限增殖，又能分泌特異性抗體      特異性強，靈敏度高，并可能大量制備

點評 本題考查了基因工程和細胞工程的有關(guān)知識，要求考生掌握乳腺生物反應(yīng)器的優(yōu)點和操作過程，識記單克隆抗體制備的過程、優(yōu)點及應(yīng)用等方面的知識．