Question

（10分）科學家將魚抗凍蛋白基因轉入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相對寒冷的環(huán)境中生長。質粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四種限制酶切割位點，下圖是轉基因抗凍番茄培育過程的示意圖（ampr為抗氨芐青霉素基因），其中①～④是轉基因抗凍番茄培育過程中的相關步驟，Ⅰ、Ⅱ表示相關結構或細胞。請據(jù)圖作答：

（1）在構建基因表達載體時，可用一種或者多種限制酶進行切割。為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實例中，應該選用限制酶___________和限制酶___________分別對___________（2分）和質粒進行切割。
（2）培養(yǎng)基中的氨芐青霉素會抑制番茄愈傷組織細胞的生長，要利用該培養(yǎng)基篩選已導入含魚的抗凍蛋白基因的番茄細胞，應使基因表達載體Ⅰ中含有______作為標記基因。
（3）研究人員通常采用___________法將魚抗凍蛋白基因導入番茄細胞內。在分子水平檢測目的基因是否翻譯形成了相應的蛋白質通常采用___________（2分）技術。
（4）利用組織培養(yǎng)技術將導入含魚的抗凍蛋白基因的番茄組織細胞培育成植株。圖中③、④依次表示組織培養(yǎng)過程中番茄組織細胞的___________和___________過程。

Answer 1

（1）PstⅠ   SmaⅠ　含魚抗凍蛋白基因的DNA（2分，只答魚的抗凍蛋白基因不給分）（2）抗氨芐青霉素基因（ampr）�。�3）農(nóng)桿菌轉化（或基因槍法、花粉管通道法等）　抗原—抗體雜交（2分）�。�4）脫分化  再分化

解析