Question

如圖是將某細(xì)菌的基因A導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)，制備“工程菌”的示意圖．

（1）獲取A的方法目前常用的有三種：一是從

 

獲��；二是利用

 

的原理，通過(guò)

 

技術(shù)擴(kuò)增；三是通過(guò)DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成．
（2）完成A和B的拼接必須要用

 

酶和

 

酶，構(gòu)建的C通常稱為

 

，它的組成中，

 

是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，

 

的作用是為了鑒別受體細(xì)胞是否含有A．
（3）常用Ca²⁺處理D，其目的是使其成為

 

細(xì)胞．
（4）目的基因可以在受體細(xì)胞中得到表達(dá)，是因?yàn)椴煌�生�?div id="vhpxxft" class='quizPutTag' contenteditable='true'> 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析題圖：圖示是將某細(xì)菌的基因A導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)，制備“工程菌”的示意圖，其中A為目的基因，B為運(yùn)載體（質(zhì)粒），C為重組質(zhì)粒，D為受體細(xì)胞．

解答： 解：（1）獲取A的方法目前常用的有三種：一是從基因文庫(kù)獲��；二是利用DNA雙鏈復(fù)制的原理，通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增；三是通過(guò)DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成．
（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，首先需用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運(yùn)載體，其次還需要用DNA連接酶連接目的基因與運(yùn)載體形成基因表達(dá)載體；基因表達(dá)載體的組成包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子和終止子等，其中啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，標(biāo)記的作用是為了鑒別受體細(xì)胞是否含有A．
（3）常用Ca²⁺處理D，可增加細(xì)胞壁的通透性，使其成為易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)細(xì)胞，這樣可以提高受體細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率．
（4）由于不同生物共用一套遺傳密碼，因此一種生物的目的基因可以在另一種生物中得到表達(dá)．
故答案為：
（1）基因文庫(kù)     DNA雙鏈復(fù)制    PCR
（2）限制性核酸內(nèi)切      DNA連接    基因表達(dá)載體（重組質(zhì)粒）    啟動(dòng)子    標(biāo)記基因
（3）感受態(tài)   
（4）共用一套遺傳密碼

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合制備“工程菌”的示意圖，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．