Question

14．番茄果實(shí)中含豐富的番茄紅素，對(duì)人體防治腫瘤、心血管疾病以及延緩衰老具有一定作用．
（1）科學(xué)家為構(gòu)建高產(chǎn)番茄紅素的酵母細(xì)胞應(yīng)用了轉(zhuǎn)基因技術(shù)，其核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體（目的基因與運(yùn)載體結(jié)合）．如圖所示其部分模式圖，位點(diǎn)1、2、3、4對(duì)應(yīng)的限制酶分別是PacⅠ、SexAⅠ、AscⅠ、PmeⅠ則獲取目的基因使用的限制酶是SexAⅠ和AscⅠ；PacⅠ能否切割位點(diǎn)2？為什么不能，因?yàn)橄拗泼妇哂刑禺愋裕?br />（2）為確定目的基因已導(dǎo)入番茄細(xì)胞中，常用DNA分子雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，最后再進(jìn)行個(gè)體水平的鑒定．
（3）科學(xué)家運(yùn)用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育出了“番茄一馬鈴薯”雜種植株，但并沒(méi)有獲得預(yù)期的性狀，主要原因是基因的表達(dá)不是孤立的，是相互調(diào)控、相互影響的．
（4）轉(zhuǎn)基因技術(shù)和植物體細(xì)胞雜交技術(shù)在育種上具有的共同意義是能克服物種間遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙．

Answer 1

分析 1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、植物體細(xì)胞雜交的意義：克服物種間遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙．
3、分析題圖：圖示為基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，經(jīng)過(guò)該過(guò)程，目的基因位于位點(diǎn)2和位點(diǎn)3之間，說(shuō)明獲取目的基因使用的限制酶是切割位點(diǎn)2和位點(diǎn)3的酶．

解答 解：（1）基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建；位點(diǎn)1、2、3、4對(duì)應(yīng)的限制酶分別是PacⅠ、SexAⅠ、AscⅠ、PmeⅠ，圖中目的基因位于位點(diǎn)2和位點(diǎn)3之間，則獲取目的基因使用的限制酶是SexAⅠ和AscⅠ；由于限制酶具有特異性，因此PacⅠ不能否切割位點(diǎn)2．
（2）檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，常用DNA分子雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，最后再進(jìn)行個(gè)體水平的鑒定．
（3）培育“番茄一馬鈴薯”雜種植株采用了了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，但并沒(méi)有獲得預(yù)期的性狀，主要原因是基因的表達(dá)不是孤立的，是相互調(diào)控、相互影響的．
（4）轉(zhuǎn)基因技術(shù)和植物體細(xì)胞雜交技術(shù)在育種上具有的共同意義是：能克服物種間遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙．
故答案為：
（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體（目的基因與運(yùn)載體結(jié)合）    SexAⅠ和AscⅠ不能，因?yàn)橄拗泼妇哂刑禺愋?br />（2）DNA分子雜交
（3）植物體細(xì)胞雜交  基因的表達(dá)不是孤立的，是相互調(diào)控、相互影響的
（4）能克服物種間遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程和植物體細(xì)胞雜交的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；識(shí)記植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程及意義，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．