生物柴油是一種可再生的清潔能源,其應(yīng)用在一定程度上能夠減緩人類對(duì)化學(xué)燃料的消耗.科學(xué)家發(fā)現(xiàn),在微生物M產(chǎn)生的脂肪酶作用下,植物油與甲醇反應(yīng)能夠合成生物柴油(如圖).
(1)篩選產(chǎn)脂肪酶的微生物M時(shí),培養(yǎng)基中添加的植物油為微生物生長(zhǎng)提供
.該培養(yǎng)基在功能上屬于
培養(yǎng)基,在物理形態(tài)上屬于
培養(yǎng)基.
(2)通常情況下,在微生物培養(yǎng)過(guò)程中,獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是
.培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是
法.無(wú)菌技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈
附近進(jìn)行,以避免周圍環(huán)境中微生物的污染.在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染.對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是
.
(3)測(cè)定培養(yǎng)液中微生物數(shù)量,可選用
法直接計(jì)數(shù).從微生物M分離提取的脂肪酶通常需要檢測(cè)
,以確定其應(yīng)用價(jià)值.同時(shí)可利用固定化細(xì)胞技術(shù)使脂肪酶能夠重復(fù)使用,固定化細(xì)胞技術(shù)一般采用的方法是
.在配制海藻酸鈉溶液時(shí),要注意
,否則可能出現(xiàn)焦糊.
(4)①若需體外擴(kuò)增脂肪酶基因,可應(yīng)用耐熱DNA聚合酶催化的
技術(shù).
②該技術(shù)過(guò)程的三個(gè)步驟:
、
和
(按順序).
③在獲得單鏈模板的方式上,該技術(shù)與體內(nèi)DNA復(fù)制不同,前者通過(guò)
解開(kāi)雙鏈,后者通過(guò)
解開(kāi)雙鏈.
④DNA鑒定時(shí),可以使用
試劑并在沸水中加熱反應(yīng)產(chǎn)生藍(lán)色.