Question

【題目】常見的釀酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖來進(jìn)行酒精發(fā)酵，自然界中某些酵母菌能分解木糖產(chǎn)生酒精，科學(xué)家欲從果園的葡萄上或土壤中分離這種酵母菌，操作如下：

（1）制備酵母菌培養(yǎng)基要進(jìn)行倒平板操作，待平板冷凝后，要將平板倒置，其主要原因是______________。獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是_____________。

（2）純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是_____________。在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次的末端開始劃線，這樣做的目的是______________。劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌落，第二劃線區(qū)域的第一條線上無菌落，其它劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤是______________。

（3）若要檢測(cè)土樣中的酵母菌含量，應(yīng)采用________法。在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)基先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是____________。然后，將1mL土壤溶液稀釋分別稀釋10倍和100倍，每種稀釋度各在3個(gè)平板上分別接入0．1mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，6個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為59、57、58、2、7和5，據(jù)此可得出每升土壤溶液中的活菌數(shù)為___________個(gè)。

Answer 1

【答案】 是防止培養(yǎng)皿蓋的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染 防止外來雜菌入侵 接種環(huán) 將聚集的菌落逐步減少以獲得單個(gè)菌落 接種環(huán)灼燒后未冷卻（或劃線未從第一區(qū)域末端開始） 稀釋涂布平板 檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格 5.8×106

【解析】試題分析：選擇培養(yǎng)基是指通過培養(yǎng)混合的微生物，僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的。利用選擇培養(yǎng)基和轉(zhuǎn)基因技術(shù)能夠篩選利用葡萄糖和木糖產(chǎn)生酒精，且對(duì)酒精的耐受能力強(qiáng)的酵母菌。

（1）為了防止培養(yǎng)皿蓋的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染，制備酵母菌培養(yǎng)基要進(jìn)行倒平板操作，待平板冷凝后，要將平板倒置。獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌入侵。

（2）純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是接種環(huán)。在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次的末端開始劃線，這樣做可以將聚集的菌落逐步減少以獲得單個(gè)菌落。劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌落，第二劃線區(qū)域的第一條線上無菌落，其它劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤是接種環(huán)灼燒后未冷卻或者劃線未從第一區(qū)域末端開始。

（3）將自然界中采集到的葡萄帶回實(shí)驗(yàn)室，用無菌水將葡萄皮上的微生物沖洗到無菌的三角瓶中，然后將瓶中的液體用涂布器涂布接種于以木糖為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，在適宜的條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，獲得能利用木糖的多個(gè)酵母菌菌落。實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基按功能屬于選擇培養(yǎng)基。

（4）若要檢測(cè)土樣中的酵母菌含量，應(yīng)采用稀釋涂布平板法。在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)基先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，用于檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格。稀釋涂布平板法中，一般選用30～300個(gè)菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)，因此采用稀釋10倍和菌落數(shù)分別為59、57、58的進(jìn)行計(jì)算，據(jù)此可得出每升土壤溶液中的活菌數(shù)為=（59+57+58）÷3×10÷（0.1×10 -3）=5.8×106個(gè)。