Question

【題目】硫酸化酶RaxST（胞外酶）是當前研究的熱點，現(xiàn)將該酶的基因通過基因工程的方式導入到大腸桿菌體內。已知大腸桿菌在表達蛋白質時，與培養(yǎng)時IPTG誘導劑濃度有關。為研究培養(yǎng)時誘導劑濃度對硫酸化酶表達量的影響，請根據以下提供的實驗材料寫出實驗思路：

實驗材料：若干培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)液，轉基因的大腸桿菌，IPTG粉末

（要求與說明：①實驗儀器、試劑、用具及操作方式不作要求；②實驗條件適宜；）

請回答：

（1）實驗思路：①………

實驗結果：實驗后發(fā)現(xiàn)，三組中，IPTG誘導濃度為中的這組，誘導后所得RaxST酶濃度高于IPTG濃度為高的和低的這兩組。

（2）根據（1）的思路和結果，請用曲線圖來體現(xiàn)這一結果。______

（3）該實驗中，轉基因技術所涉及的變異原理是______ 。

（4）大腸桿菌生產得到的硫酸化酶RaxST（胞外酶）___________是/否）具有生物活性。

Answer 1

【答案】1、取等量培養(yǎng)液放置于三個培養(yǎng)瓶中，編號ABC

2、分別在ABC三個瓶中分別加入較少量、中量和較多量的IPTG粉末，振蕩搖勻

3、取大腸桿菌稀釋后，分別等量接種于ABC三個瓶中，于適宜條件下培養(yǎng)

4、每隔相同的時間測定三組中的硫酸化酶濃度并記錄

5、對實驗數據進行統(tǒng)計分析 基因重組 否

【解析】

據題意可知，該實驗的目的是研究培養(yǎng)時誘導劑濃度對硫酸化酶表達量的影響，按照按照單一變量原則設計實驗即可。

（1）該實驗為研究培養(yǎng)大腸桿菌時誘導劑濃度對硫酸化酶表達量的影響，實驗自變量為誘導劑濃度，因變量為硫酸化酶表達量，即硫酸化酶濃度，除誘導劑濃度外，其他條件應相同且適宜。每隔相同的時間，測定硫酸化酶濃度，并且記錄。最后對統(tǒng)計的全部數據進行處理，繪制曲線。故具體實驗思路為：

1、取等量培養(yǎng)液放置于三個培養(yǎng)瓶中，編號A、B、C；

2、分別在A、B、C三個瓶中分別加入較少量、中量和較多量的IPTG粉末，振蕩搖勻；

3、取大腸桿菌稀釋后，分別等量接種于A、B、C三個瓶中，于適宜條件下培養(yǎng)；

4、每隔相同的時間測定三組中的硫酸化酶濃度并記錄；

5、對實驗數據進行統(tǒng)計分析。

（2）由于實驗結果未： IPTG誘導濃度為中的這組，誘導后所得RaxST酶濃度高于IPTG濃度為高的和低的這兩組，所以可繪圖如下：

（3）轉基因技術的原理是基因重組。

（4）硫酸化酶RaxST是胞外酶，需要通過內質網和高爾基體的加工才具有生物活性，而大腸桿菌為原核生物，沒有內質網和高爾基體，所以在大腸桿菌內合成的硫酸化酶RaxST沒有生物活性。