【生物--選修3:現(xiàn)代生物科技專題】
“基因靶向”技術(shù),指的是應(yīng)用DNA同源重組原理,通過一定的載體,用設(shè)計(jì)好的目的基因替代靶基因,從而達(dá)到使靶基因功能喪失的目的.借助這一技術(shù),科學(xué)家可以用小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn),使其體內(nèi)的某項(xiàng)特定基因喪失功能,以幫助人們找到治療疾病的有效方法.下面是該實(shí)驗(yàn)的基本過程,請(qǐng)回答有關(guān)問題:
(1)獲取目的基因.
①經(jīng)過修飾使靶基因的功能改變或喪失就可獲得目的基因.如果要獲得活性降低了的X酶蛋白的目的基因,可以根據(jù)此蛋白的結(jié)構(gòu)及功能進(jìn)行X酶基因的改造,這一技術(shù)叫做
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②為了提高實(shí)驗(yàn)成功率,需要通過
技術(shù)擴(kuò)增目的基因,以獲得目的基因的大量拷貝.
(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體.
一個(gè)基因表達(dá)載體的組成,除了目的基因以外,還必須有
基因,以便于細(xì)胞的篩選.質(zhì)粒具有的一至多個(gè)
位點(diǎn),使目的基因插入其中成為可能,因此常被選作運(yùn)載體.
(3)將基因表達(dá)載體導(dǎo)入ES細(xì)胞,并從中篩選,然后培育出小鼠.
①由ES細(xì)胞培育出小鼠的過程中,主要應(yīng)用了
技術(shù)和
技術(shù).
②為了確定該小鼠體內(nèi)是否成功發(fā)生了基因的同源重組,可通過觀察小鼠的性狀來檢
測(cè),這屬于
水平的鑒定.
③獲得胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞).實(shí)驗(yàn)一般采用ES細(xì)胞作為目的基因的受體細(xì)胞,這是
因?yàn)镋S細(xì)胞具有
.請(qǐng)舉出一例獲取ES細(xì)胞的常用方
法:
.
(4)上述基因工程過程中,屬于核心步驟的是
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