Question

【題目】某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而開展了一個(gè)探究實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)過程包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察與計(jì)數(shù)等。請(qǐng)回答下列問題：

（1）制備培養(yǎng)基時(shí)，配方一般都含有水、碳源、氮源和________________________。

（2）接種環(huán)在接種前必須__________________________滅菌，然后待其冷卻后再進(jìn)行接種，冷卻的目的是_____________。

（3）用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)細(xì)菌個(gè)數(shù)時(shí)，為使估計(jì)值更接近實(shí)際值，應(yīng)保證待測樣品稀釋度足夠高，原因是__________________________。

（4）將1mL水樣稀釋100倍后在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.lmL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為46、40、37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為__________________________。統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目__________________________。

（5）可通過觀察平板上菌落的特征，如_____________（寫兩個(gè)），來判斷湖水樣品中細(xì)菌的種類。

（6）為了使實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠，應(yīng)同時(shí)在另一滅菌的空白平板上接種_____________作為對(duì)照組。

Answer 1

【答案】 無機(jī)鹽 灼燒 避免接種環(huán)境溫度太高，殺死菌種 稀釋度高的菌液中，微生物被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表明形成的單個(gè)菌落 4.1×107 低 形狀、大小、隆起程度、顏色 無菌水

【解析】本題考查微生物的培養(yǎng)，識(shí)記微生物培養(yǎng)中的相關(guān)知識(shí)點(diǎn)是解題關(guān)鍵

（1）培養(yǎng)基的營養(yǎng)組成一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽

（2）對(duì)接種環(huán)等接種工具用灼燒滅菌法，接種環(huán)在接種前必須灼燒滅菌，然后待其冷卻后再進(jìn)行接種，避免接種環(huán)境溫度太高，殺死菌種。

（3）稀釋涂布法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，再將不同稀釋度的菌液分別涂布在固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落，所以用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)細(xì)菌個(gè)數(shù)時(shí)，為使估計(jì)值更接近實(shí)際值，應(yīng)保證待測樣品稀釋度足夠高。

（4）因?yàn)椴煌�平板之間的數(shù)據(jù)有差異，故用其平均值作為估算的最終結(jié)果，故每升水樣中的活菌數(shù)為4.1×107; 有些活菌在培養(yǎng)過程中死亡,另外有些菌落是由多個(gè)活菌共同形成的,所以按形成的菌落數(shù)目來計(jì)算活菌數(shù)目,結(jié)果往往會(huì)低于活菌實(shí)際數(shù)目

（5）菌落特征包括菌落的大小、形狀、邊緣、光澤、質(zhì)地、隆起程度、顏色和透明程度等

(6) 為了使實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠，應(yīng)同時(shí)在另一滅菌的空白平板上接種無菌水作為對(duì)照組。

[點(diǎn)睛]： 微生物培養(yǎng)的易考點(diǎn)①培養(yǎng)基：包括組成成分、種類、②常用接種方法:平板劃線法一般多用于菌種的純化,可以觀察菌落特征，對(duì)混合菌進(jìn)行分離; 稀釋涂布平板法一般多用于篩選菌株,可以計(jì)數(shù)，可以觀察菌落特征.③無菌技術(shù)：注意滅菌與消毒的區(qū)別；④計(jì)數(shù)：顯微鏡直接計(jì)數(shù)和間接計(jì)數(shù)法；⑤操作過程的注意事項(xiàng)等。