【題目】動物細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能,F(xiàn)在已經(jīng)廣泛應(yīng)用于多種研究工作中,特別是新發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù),為制備單克隆抗體開辟了新途徑。研究表明DNA合成有兩條途徑:“S途徑”和“D途徑”,淋巴細(xì)胞(B淋巴細(xì)胞)有“S途徑”和“D途徑”;骨髓瘤細(xì)胞只有“D途徑”;HAT培養(yǎng)液中氨基喋呤可以阻斷DNA合成的“D途徑”。下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖;卮鹣铝袉栴}:
(1)_______、_______技術(shù)是制備單克隆抗體的基礎(chǔ)。
(2)單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比,最大的優(yōu)越性是_________。
(3)雜交瘤細(xì)胞既具備骨髓瘤細(xì)胞的____________________________的特點(diǎn),又具備淋巴細(xì)胞的_______的特點(diǎn)。
(4)圖示用HAT培養(yǎng)液篩選出雜交瘤細(xì)胞的過程中,融合的淋巴細(xì)胞(B淋巴細(xì)胞)在HAT培養(yǎng)液中不生長的原因是_________,融合的骨髓瘤細(xì)胞在HAT培養(yǎng)液中不生長的原因是_____________________________________________
【答案】動物細(xì)胞融合 動物細(xì)胞培養(yǎng) 特異性強(qiáng)、靈敏度高,可大量制備 在體外大量增殖(無限增殖) 分泌特異性抗體 缺乏在體外培養(yǎng)液中增殖的能力 其DNA合成途徑被氨基喋呤阻斷而不能進(jìn)行DNA復(fù)制
【解析】
單克隆抗體制備過程中兩次篩選的方法及目的:
項(xiàng)目 | 第一次篩選 | 第二次篩選 |
篩選原因 | 誘導(dǎo)融合后得到多種雜交細(xì)胞,另外還有未融合的細(xì)胞 | 由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激,所以經(jīng)選擇性培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞中有能產(chǎn)生其他抗體的細(xì)胞 |
篩選方法 | 用特定的選擇培養(yǎng)基篩選:未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞(“BB”細(xì)胞、“瘤瘤”細(xì)胞)都會死亡,只有融合的雜交瘤細(xì)胞(“B瘤”細(xì)胞)才能生長 | 用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng),在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測,經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群 |
篩選目的 | 得到雜交瘤細(xì)胞 | 得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞 |
(1)制備單克隆抗體過程為:將能夠產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,獲得既能產(chǎn)生抗體、又能無限增殖的雜種細(xì)胞,然后將其在體外或體內(nèi)條件下大規(guī)模培養(yǎng),獲得大量特異性抗體。因此單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和細(xì)胞融合技術(shù)。
(2)與常規(guī)的血清抗體相比,單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)在于它的特異性強(qiáng)、靈敏度高,并可能大量制備。
(3)雜交瘤細(xì)胞是骨髓瘤細(xì)胞和淋巴細(xì)胞融合形成的雜種細(xì)胞,具備兩種細(xì)胞的特點(diǎn),既能迅速大量繁殖,又能產(chǎn)生專一的抗體。
(4)HAT選擇培養(yǎng)基含有次黃嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶,其中氨基喋呤可阻斷DNA合成的主要途徑。主要途徑阻斷后,依靠應(yīng)急途徑,即在HGPRT(次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶)和TK(胸苷激酶)的作用下,利用胸腺嘧啶和次黃嘌呤合成DNA,缺少其中一種,DNA合成都不能發(fā)生。用于雜交的骨髓瘤細(xì)胞不含TK和HGPRT,故單個(gè)或融合骨髓瘤細(xì)胞將在HAT培養(yǎng)液中死亡。B淋巴細(xì)胞雖然有HGPRT和TK,但在體外培養(yǎng)條件下難以長期存活和增殖傳代。因此只有雜交瘤細(xì)胞才能在HAT培養(yǎng)液中生長繁殖。綜上所述,圖示用HAT培養(yǎng)液篩選出雜交瘤細(xì)胞的過程中,融合的淋巴細(xì)胞(B淋巴細(xì)胞)在HAT培養(yǎng)液中不生長的原因是缺乏在體外培養(yǎng)液中增殖的能力,融合的骨髓瘤細(xì)胞在HAT培養(yǎng)液中不生長的原因是其DNA合成途徑被氨基喋呤阻斷而不能進(jìn)行DNA復(fù)制。
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科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】基因型為MmNn的某高等動物細(xì)胞,其減數(shù)分裂(減數(shù)的兩次分裂分別用MⅠ、MⅡ表示)某時(shí)期的示意圖如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是
A. 該細(xì)胞分裂后最終形成1種類型的卵細(xì)胞
B. 基因N與n、n與n分別在MⅠ、MⅡ后期分離
C. 與該細(xì)胞同時(shí)產(chǎn)生的另一個(gè)細(xì)胞的基因組成可能為mmNN
D. 該細(xì)胞為次級卵母細(xì)胞,含2對同源染色體
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科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】下列關(guān)于人體內(nèi)環(huán)境的描述中,錯(cuò)誤的是 ( )
A. 血漿的主要成分包括水、葡萄糖、血紅蛋白和激素等
B. 外環(huán)境的變化和體內(nèi)細(xì)胞代謝會引起內(nèi)環(huán)境理化性質(zhì)變化
C. HCO、HPO等參與維持血漿pH相對穩(wěn)定
D. 淋巴細(xì)胞生活的液體環(huán)境是淋巴、血漿等
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科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】如圖甲為細(xì)胞中某一結(jié)構(gòu)的模式圖,圖乙表示圖甲中3的成分及其各級結(jié)構(gòu)。下列敘述正確的是( )
A.圖甲所示結(jié)構(gòu)為細(xì)菌的細(xì)胞核亞顯微結(jié)構(gòu)圖
B.人的胰島細(xì)胞比口腔上皮細(xì)胞中甲圖2結(jié)構(gòu)的數(shù)目多
C.圖乙中①為蛋白質(zhì)分子,檢測②的試劑為斐林試劑
D.圖乙中③和④的化學(xué)本質(zhì)不同
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科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】某男性產(chǎn)生性染色體組成為(a)XY和(b)YY的精子,可能的原因是
A. a和b均為減Ⅰ分裂異常
B. a和b均為減Ⅱ分裂異常
C. a減Ⅰ分裂異常,b減Ⅱ分裂異常
D. a減Ⅱ分裂異常,b減Ⅰ分裂異常
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科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】間期細(xì)胞內(nèi)發(fā)生復(fù)雜的變化,其中復(fù)制的結(jié)果是( )
A.DNA分子數(shù)增加了一倍,染色體數(shù)目不變
B.DNA分子數(shù)和染色體數(shù)目都增加一倍
C.DNA含量不變,染色體數(shù)目增加一倍
D.DNA含量和染色體數(shù)都不變
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科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】下列不屬于可遺傳的變異的是
A. 黃色圓粒豌豆自交,后代出現(xiàn)黃圓、黃皺、綠圓和綠皺四種表現(xiàn)型
B. 青霉菌經(jīng)一定劑量紫外線照射后,產(chǎn)青霉素的能力提高
C. 西瓜果實(shí)生長過程中,置于方型容器中,西瓜長成方型
D. 用秋水仙素處理二倍體西瓜幼苗,培育出四倍體西瓜
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科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】關(guān)于下圖所示生物或細(xì)胞的敘述,正確的是
A. 圖甲和圖乙沒有染色體,遺傳信息儲存在RNA中
B. 圖乙和圖丁都能進(jìn)行光合作用制造有機(jī)物
C. 圖乙、圖丙和圖丁均有由纖維素和果膠構(gòu)成的細(xì)胞壁
D. 四幅圖的生物維持生命活動的能量都由自身呼吸作用提供
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