Question

【題目】為了研究手機屏幕上的細菌數(shù)量和種類，有人做了下圖所示的實驗。回答下列問題：

（1）在培養(yǎng)基的制備過程中，培養(yǎng)基中必須含有滿足微生物生長、繁殖所需的水、無機鹽、碳源和________等成分；在倒平板時，需待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時，在__________附近倒平板，待平板冷卻后需倒置，其原因是_______________________________________ 。

（2）圖中采取的接種方法是________________，實驗結(jié)束后，所用的培養(yǎng)基必須經(jīng)過滅菌處理后才能倒掉的原因是_______________。

（3）若按圖中方法取樣，測定某手機屏幕上的細菌數(shù)量，制成10mL菌懸液中，在3個平板上分別接入0．1mL稀釋液，經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為38、40和42，則該手機屏幕的細菌數(shù)為__________個/cm2。該方法計數(shù)的結(jié)果往往比實際結(jié)果偏__________（填“高”或“低”），原因是_____________________________________。

Answer 1

【答案】氮源 酒精燈火焰 既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染 稀釋涂布平板法 防止污染環(huán)境或感染其他生物 160 低 當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落

【解析】

測定培養(yǎng)液中微生物的數(shù)目，可采用顯微鏡直接計數(shù)(或血細胞計數(shù)板計數(shù))法對培養(yǎng)液中的微生物直接計數(shù)，也可用稀釋涂布平板法將微生物接種于滅菌后的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，通過計數(shù)菌落數(shù)目計算培養(yǎng)液中微生物的數(shù)目。由于采用第一種方法計數(shù)時不能剔除死菌，采用第二種方法計數(shù)時，當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，所以第一種方法統(tǒng)計的數(shù)目比實際活菌數(shù)目高，第二種方法統(tǒng)計的數(shù)目比實際活菌數(shù)目低。

（1）培養(yǎng)基中必須含有滿足微生物生長、繁殖所需營養(yǎng)物質(zhì)，包括四類的水、無機鹽、碳源和氮源等成分；在倒平板時，需待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時，酒精燈火焰旁是無菌區(qū)，所以，倒平板操作通常在在酒精燈火焰附近進行，待平板冷卻后，需將平板倒置，這樣既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。

（2）根據(jù)圖中菌落的分布情況可知，接種時采取的是稀釋涂布平板法，實驗結(jié)束后，為防止污染環(huán)境或感染其他生物，所用的培養(yǎng)基必須經(jīng)過滅菌處理后才能倒掉。

（3）用稀釋涂布平板法進行計數(shù)時，首先統(tǒng)計平板中的菌落數(shù)，然后求均值，再計算，（38+40+42）/3=40，40/0.1=400個/mL，則手機屏幕的細菌數(shù)為400×10/25=160個/cm2。該方法計數(shù)的結(jié)果往往比實際結(jié)果偏低，因為在稀釋涂布時，可能會出現(xiàn)兩個或多個細胞連在一起的情況，此時平板上觀察到的只是一個菌落。