Question

3．某同學(xué)用新鮮酸奶為實(shí)驗(yàn)材料初步分離純化乳酸菌．分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有15%的脫脂乳而不透明，乳酸菌能分解利用培養(yǎng)基中的蛋白質(zhì)等物質(zhì)．回答下列問題
（1）培養(yǎng)基的組成成分除乳酸菌生長繁殖所需的營養(yǎng)物質(zhì)外，還必須添加瓊脂．
（2）推測培養(yǎng)基中加入脫脂乳的作用是乳酸菌的（初步）鑒定，為乳酸菌提供N源等各種營養(yǎng)物質(zhì)．
（3）分離純化如果用稀釋涂布平板法，梯度稀釋時(shí)應(yīng)該用無菌水對酸奶進(jìn)行稀釋．
（4）分離純化如果用平板劃線法，首次劃線灼燒接種環(huán)的目的是防雜菌污染，為保證得到單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落，操作時(shí)必須做到
①每次劃線前灼燒接種環(huán)；
③從第二次開始每次劃線都從上次劃線末端開始劃線．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基按物理性質(zhì)分：

名稱	特征	功能
固體培養(yǎng)基	外觀顯固體狀態(tài)的培養(yǎng)基	主要用于微生物的分離、鑒定
液體培養(yǎng)基	呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基	主要用于工業(yè)生產(chǎn)

2、劃線分離操作中的有關(guān)問題：
（1）在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)．

	第一次灼燒	每次劃線之前灼燒	劃線結(jié)束灼燒
目的	避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基	殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種	殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染或感染操作者

②在灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后再進(jìn)行劃線，以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種．
③在進(jìn)行第二次以及其后的劃線操作時(shí)'要從上一次劃線的末端開始劃線．每次劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落．

解答 解：（1）選擇培養(yǎng)基和部分鑒別培養(yǎng)基以及用于分離純化的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，一般要加瓊脂．
（2）脫脂乳被乳酸菌分解利用后形成透明圈，可以對乳酸菌進(jìn)行初步鑒定，同時(shí)脫脂乳也給乳酸菌提供了N源等各種營養(yǎng)物質(zhì)（包括維生素）．
（3）梯度稀釋時(shí)要用無菌水，以防雜菌污染．
（4）首次接種灼燒是為了防雜菌污染．為保證得到單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落，操作時(shí)必須做到每次劃線前灼燒接種環(huán)，從第二次開始，每次劃線都從上次劃線末端開始劃線．
故答案為：
（1）瓊脂
（2）乳酸菌的（初步）鑒定        為乳酸菌提供N源等各種營養(yǎng)物質(zhì)
（3）無菌水
（4）防雜菌污染
①每次劃線前灼燒接種環(huán)     ②每次劃線都從上次劃線末端開始劃線

點(diǎn)評 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記培養(yǎng)基的成分、種類及功能；識記接種微生物常用的兩種方法以及各種方法的操作中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．