Question

現(xiàn)代生物技術(shù)及其應(yīng)用：
嗜熱土壤芽孢桿菌產(chǎn)生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一種耐熱纖維素酶，為使其在工業(yè)生產(chǎn)中更好地應(yīng)用，開展了以下試驗(yàn)：
【利用大腸桿菌表達(dá)BglB】
（1）PCR 擴(kuò)增bglB基因時，選用

 

基因組DNA作模板．
（2）如圖為質(zhì)粒限制酶酶切圖譜．bglB基因不含圖中限制酶識別序列，為使PCR擴(kuò)增的bglB基因重組進(jìn)該質(zhì)粒，擴(kuò)增的bglB基因兩端需分別引入

 

 和

 

兩種限制酶的識別序列．
（3）大腸桿菌不能降解纖維素，但轉(zhuǎn)入上述構(gòu)建好的表達(dá)載體后則獲得了降解纖維素的能力，這是因?yàn)?div id="yewgmos" class='quizPutTag' contenteditable='true'> 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標(biāo)記基因．
限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
目的基因應(yīng)插入啟動子和終止子之間．

解答： 解：（1）根據(jù)題意可知，嗜熱土壤芽胞桿菌產(chǎn)生β-葡萄糖苷酶（BglB），因此PCR擴(kuò)增bglB基因時，選用嗜熱土壤芽孢桿菌基因組DNA作模板．
（2）根據(jù)啟動子和終止子的生理作用可知，目的基因應(yīng)導(dǎo)入啟動子和終止子之間．圖中看出，兩者之間存在于三種限制酶切點(diǎn)，但是由于Xbal在質(zhì)粒不止一個酶切位點(diǎn)，因此為使PCR擴(kuò)增的bglB基因重組進(jìn)該質(zhì)粒，擴(kuò)增的bglB基因兩端需分別引入NdeⅠ和BamHⅠ不同限制酶的識別序列．
（3）大腸桿菌不能降解纖維素，但轉(zhuǎn)入上述建構(gòu)好的表達(dá)載體后則獲得了降解纖維素的能力，這是因?yàn)檗D(zhuǎn)基因的大腸桿菌分泌出有活性的BglB酶．
故答案為：
（1）嗜熱土壤芽孢桿菌
（2）NdeⅠBamHⅠ
（3）轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌分泌出有活性的BglB酶

點(diǎn)評：本題考查基因工程原理，考查學(xué)生分析問題和解決問題的能力．