Question

【題目】以下是有關(guān)現(xiàn)代生物科技的兩個(gè)問題。請回答：

I.下而是與動(dòng)物細(xì)胞工程有關(guān)的問題，請分析回答：

(1)在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，首先要將動(dòng)物組織剪碎，然后用___處理，以使其分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。

(2)氣體環(huán)憧中CO2的作用是_________。

(3)應(yīng)用于核移植的供體細(xì)胞一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞.原因是10代以后細(xì)胞可能發(fā)生___________。

(4)單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，具有________的特點(diǎn)。

II.轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程如下圖所示，圖中I.、I、EcoRI、ApaI等為限制酶，質(zhì)粒和抗病基因上的箭頭表示限制酶的切割位點(diǎn)。下圖表示四種限制酶的識別序列及酶切點(diǎn)。

(1)若要獲得抗病基因，能否用限制酶SmaI對圖中對應(yīng)的位點(diǎn)進(jìn)行切割?_______。要獲得含抗病基因的重組質(zhì)粒能否用PstI、 ApaI限制酶切割質(zhì)粒?_________。

(2)卡那霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長，根據(jù)這一原理可以利用含卡那霉素的培基篩選已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的香蕉細(xì)胞，由此推斷重組質(zhì)粒中應(yīng)含有___基因。作為標(biāo)記基因。

(3)②、③階段是否可使用同種培養(yǎng)基?_______ 。

Answer 1

【答案】 胰蛋白酶 維持培養(yǎng)液pH 遺傳物質(zhì)的突變 特異性強(qiáng)，靈敏度高 不能 不能 抗卡那霉素 不能

【解析】分析題圖：含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位點(diǎn)，其中SmaⅠ酶的切割位點(diǎn)位于抗病基因（目的基因）上；質(zhì)粒含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ的切割位點(diǎn)，所以要活動(dòng)重組質(zhì)粒，可以用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ進(jìn)行切割，①→②表示脫分化過程、②→③表示再分化過程、④是新植體。

Ⅰ、（1）在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，首先要將動(dòng)物組織剪碎，然后用胰蛋白酶處理，以使其分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。

（2）氣體環(huán)境中CO2的作用是維持培養(yǎng)液pH．

（3）應(yīng)用于核移植的供體細(xì)胞一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是10代以后細(xì)胞沒有發(fā)生遺傳物質(zhì)的突變，能保持正常的二倍體核型。

（4）單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，優(yōu)點(diǎn)是：特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備。

Ⅱ、（1）因?yàn)橄拗泼?/span>SmaⅠ的切割位點(diǎn)位于抗病基因上，對SmaⅠ位點(diǎn)進(jìn)行切割破壞了抗病基因的結(jié)構(gòu)，所以要獲得抗病基因，不能否用限制酶SmaⅠ對圖中對應(yīng)的位點(diǎn)進(jìn)行切割．要獲得含抗病基因的重組質(zhì)粒，也不能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割質(zhì)粒，因?yàn)楹�有抗病基因的外�?/span>DNA分子上沒有ApaⅠ限制酶切割位點(diǎn)。

（2）欲利用含卡那霉素的培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，重組質(zhì)粒中應(yīng)同時(shí)含有抗卡那霉素基因，作為標(biāo)記基因。

（3）決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要．②、③階段培養(yǎng)基中生長素與細(xì)胞分裂素的比值不同，因此這兩個(gè)階段不能是用同種培養(yǎng)基。